还在为碱性蛋白(pI>7)
天然构象易丢失、条带模糊而发愁?
传统Tris-Gly系统让碱性蛋白“寸步难行”?
索莱宝新推出
碱性蛋白Native PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
为您的实验排忧解难!
产品介绍
各种蛋白质分子由于所含的碱性氨基酸和酸性氨基酸的数目不同,因而有各自的等电点。凡碱性氨基酸含量较多的蛋白质称为碱性蛋白质,等电点偏碱性,pI>7.0,如组蛋白、精蛋白等。反之,凡酸性氨基酸含量较多的蛋白质,等电点就偏酸性,pI< 7.0。分离碱性蛋白时,要利用低pH凝胶系统,分离酸性蛋白时,要利用高pH凝胶系统。酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会带负电荷,蛋白会向阳极移动;而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,会向阴极移动,这时候需要将阴极和阳极倒置才可以电泳(即红→阴极(黑),黑→阳极(红))。
本试剂盒不适用于总蛋白样品的电泳,也不适用于总蛋白分离后的Western Blot检测;推荐应用于纯化后蛋白的碱性蛋白电泳。
产品组成
产品应用
① 可用于碱性蛋白活性显色检测:
可直接定位凝胶中具有特定功能的碱性蛋白条带。
② 可用于蛋白回收鉴定与功能验证:
进一步明确凝胶中目标碱性蛋白或进行体外功能验证。
③ 可用于分析复合物的组成及分子量鉴定:
非变性凝胶可以保留蛋白复合物,可以通过考马斯亮蓝染色来进行半定量分析。
结果示例
产品亮点
① 零变性环境:
本试剂盒无SDS和还原剂,样品无需加热制样,保留蛋白的活性和天然构象。
② 条带清晰锐利:
本试剂盒在非变性条件下,可通过分子筛效应实现碱性蛋白的高分辨分离,条带锐利、拖尾少。
③ 配备全过程试剂:
本试剂盒包含碱性蛋白凝胶和样品制备以及后续电泳所需的全部试剂,可用于配制30-50块1.5mm厚度常规大小的Native-PAGE凝胶,用户只需自备制胶器具和蒸馏水。
常见FAQs
只能跑碱性蛋白吗?中性/酸性能不能跑?
推荐pI≥7,部分中性也能跑,但酸性蛋白(pI<5)建议使用常规pH8.8体系。
一盒能配多少块胶,能加多少样品?
标配30-50块1.5mm厚度凝胶,可加约300-500个样品。
电泳条件怎么设计?
参考电压为S1:100V,15min;S2:150V,1h,也可以尝试150V恒温电压45-65min。
怎么检测电泳分离效果?
可以用溶菌酶或者BSA样品做阳性对照检测电泳分离效果。
产品推荐
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货号 |
名称 |
规格 |
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G4846 |
5×碱性蛋白电泳缓冲液 (非变性电泳) |
500mL |
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G4847 |
5×碱性蛋白电泳缓冲液 (非变性电泳,粉剂) |
1L/10*1L |
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G4848 |
5×甲基绿碱性蛋白上样缓冲液 |
10mL |