Cell counting KIT-8 (CCK-8)日本原装
  • 品牌:日本同仁
  • 产地:日本
  • 货号:CK04
  • 价格: ¥询价
  • 发布日期: 2019-05-30
  • 更新日期: 2024-03-19
产品详请
品牌 同仁
货号 CK04
保存条件 4℃避光
英文名称 CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒
保质期 1年个月

 产品简介

产品名称 规格 包装

CK04Cell counting KIT-8 (CCK-8)原装同仁 

CK04Cell counting KIT-8 (CCK-8)原装   同仁

保存:4℃密封避光保存,有效期一年。

产品说明

    Cell Counting Kit-8 简称CCK-8 试剂盒,为MTT 法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒使用说明:

一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)

1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。

2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5 个细胞浓度梯度,每组3-6 个复孔。

3、接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8 试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8 后的培养时间。)

CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒二、细胞活性检测

1、在96 孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2 的条件下)。

2、向每孔加入10μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD 值的读数)。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4 小时。

4、用酶标仪测定在450nm 处的吸光度。

5、如果暂时不测定OD 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M 的HCl 或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24 小时内吸光度不会发生变化。

活力计算:. 

细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[ A(0 加药)-A(空白)]×100 

A(加药):具有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度 

A(空白):具有培养基和 CCK-8 溶液而没有细胞的孔的吸光度 

A(0 加药):具有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力 

注意事项: 

①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。 

②白细胞可能需要培养较长时间。 

③当使用标准 96 孔板时,贴壁细胞的小接种量至少为 1 ,000 个/孔 (100 μL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于 2,500 个/孔 ( 100 μL 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的 10% 加入 CCK-8 溶液。 

④如果没有 450nm 的滤光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之间的滤光片,但是 450nm 检测灵敏度高。 

⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。 

CCK----8 法与其它检测?法之间的mtt法较: 详见说明书  


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