产地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
货号 | SEKR-0009 |
检测方法 | 双抗体夹心法 |
数量 | 10 |
标记物 | 肿瘤坏死因子α |
纯度 | % |
样本 | 血清、血浆或细胞培养上清液等样本 |
应用 | Elisa检测 |
大鼠白介素TNF-a ELISA试剂盒
产品编号#:SEKR-0009
适用于大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本
结果判断:
1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测,参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测,请用 450 nm 的OD测定值减去630 nm的OD测定值。
2.计算标准品、样品的平均OD值:每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值
3.以标准品浓度为横坐标,吸光度OD值为纵坐标,用软件绘制标准曲线,样品中TNF-a含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
4.若标本OD值高于标准曲线上限,应做适当稀释后重新检测,计算浓度时再乘以稀释倍数。
参数表征:
1. 数据及标准曲线
标准品浓度(pg/ml) | OD值1 | OD值2 | 平均值 | 矫正值 |
0 | 0.042 | 0.043 | 0.0425 | --- |
31.25 | 0.079 | 0.086 | 0.0825 | 0.040 |
62.5 | 0.189 | 0.176 | 0.1825 | 0.140 |
125 | 0.326 | 0.306 | 0.316 | 0.273 |
250 | 0.531 | 0.553 | 0.542 | 0.499 |
500 | 0.839 | 0.852 | 0.845 | 0.803 |
1000 | 1.465 | 1.429 | 1.447 | 1.404 |
2000 | 2.531 | 2.571 | 2.551 | 2.508 |
2. 灵敏度:
*可检测大鼠TNF-a浓度达15pg/ml,
20个零标准品浓度OD的平均值加上两个标准差,计算相应的可检测浓度。
3. 特异性:
不与大鼠 GDNF、 IFN-γ、 IL-1β、 IL-2、 IL-4、 β-NGF等反应,人TNF-a、 TNF-β等反应
4. 重复性:
板内,板间变异系数<10%
5. 回收率:
在选取的健康大鼠血浆、细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠 TNF-a,计算回收率。
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围(%) |
血浆 | 89 | 82-101 |
细胞培养上清 | 91 | 85-108 |
6. 线性稀释:
分别在选取的4 份健康大鼠血浆和细胞培养上清中加入高浓度大鼠 TNF-a,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。