质粒小量提取试剂盒

质粒小量提取试剂盒介绍:

        本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，通过吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的特性提取质粒DNA。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。从1-5ml大肠杆菌LB培养液中，可快速提取5-15μg纯净地高拷贝质粒DNA，提取率达85-90％。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学试验，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。

产品包装：

注意事项：
1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA
     全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙
     醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇 )。
3、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现
     象，可在37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。
4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即盖紧盖子，如非指明，所
     有离心步骤均为使用台式离心机 室温下进行离心。
5、如果是提取革兰氏阳性菌质粒，必须在裂解细胞前破细胞
     壁，方法如下：收集适量菌体，加入250ul溶液Ⅰ，充分悬浮
     菌体，加入溶菌酶至终浓度为10-20mg/ml，37℃处理30min
     左右。加入溶菌酶的浓度和处理时间可根据不同的菌株和具体
     试验条件进行调整。
6、洗脱缓冲液的体积好不少于50ul，体积过小会影响回收效
     率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液
     应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范
     围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。

相关文献：

《A rapid and efficient one-step site-directed deletion, insertion, and substitution mutagenesis protocol》 作者:Deguang Wu，Xuewu Guo，Jun Lu，Xi Sun，Feng Li，Yefu Chen，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23256925
《Enhanced freeze tolerance of baker’s yeast by overexpressed trehalose-6-phosphate synthase gene (TPS1) and deleted trehalase genes in frozen dough》 作者:Haigang Tan,Jian Dong,Guanglu Wang,Haiyan Xu,Cuiying Zhang,Dongguang Xiao 期刊:Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 影响因子:2.533 PMID:24951963
《A two-step integration method for seamless gene deletion in baker’s yeast》 作者:Jian Dong，Guanglu Wang，Cuiying Zhang，Haigang Tan，Xi Sun，Mingyue Wu，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23597844