产品简介

T1300 100ml 不含酚红

T1320 100ml 含酚红

胰蛋白酶为蛋白质水解酶，作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。胰蛋白酶工作部位在小肠,此处为碱性环境,PH为8左右这决定了胰蛋白酶最适ph值为8。胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解，这个催化过程是不需要能量的，不会使酶失去活力，也不会改变形状和使自身水解。不同的蛋白酶可以作用在不同氨基酸相连组成的肽键，因此胰蛋白酶并不能作用在所有的肽键。

胰蛋白酶配制方法：

1. 称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右）或 PBS （ D-hanks ）液中。搅拌混匀，置于 4℃ 内过夜。

2. 用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（ 0.22 微米微孔滤膜）抽滤除菌。

3. 分装成小瓶于 -20℃ 保存以备使用可！

产品说明：

    在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA 等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

    索莱宝生产的胰蛋白酶-EDTA 消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM），溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化2 分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚红和不含酚红2 类产品，酚红具有pH 指示作用。

保存：-20℃保存，有效期12个月。

使用方法：

1. 贴壁细胞的消化：

a) 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c) 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心1 分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

2. 组织的消化：

不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项：

1．由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否

则会影响细胞贴壁和生长状况；

2．本产品不含抑菌剂，在使用过程中要特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染；

3．不宜4℃长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关文献：

《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.486 PMID:30858699

公司简介 

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