产品简介 

  1.中文名：支原体检测试剂盒 

  2.产品内容  Hoechst 33258 工作液 50ml 

              固定液  50ml 

              抗荧光衰减封片液  10ml 

              说明书  1 份 

 3.货  号：CA1080

 4.品  牌：solarbio

 5.储存条件：4℃保存，有效期为 2 年，Hoechst 工作液需要避光保存。

 6.用  途 :

    本试剂盒是利用荧光染料（bisbenzimide,Hoechst 33258）检测支原体污染。这种染料会结合到 DNA的 A-T 富集区域，因为支原体的 DNA 中 A-T 含量高（55％～80％），所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的 DNA染色斑，说明有支原体污染。Hoechst 33258 的大激发波长为 346nm，大发射波长为 460nm；Hoechst 33258 和双链DNA结合后，大激发波长为 352nm，大发射波长为 461nm。 

操作步骤：   

贴壁细胞： 

1、被检细胞接种于无菌的 6 孔细胞培养板中，接种密度为 1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。 

2、5 天后，先吸去培养液，再加入 1ml 的固定液，静置 20min， 

3、吸去固定液，晾干。 

4、于每孔中，加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液（Hoechst 33258 工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置 15-20min 或室温静置 20～30min。 

5、吸去 Hoechst 33258 工作液，加入 2ml 灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。 6、荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。 

悬浮细胞： 

1、收集需检测的细胞，1500rpm，5min。 

2、将收集的细胞涂片于载玻片上，再加 1ml 的固定液，静置 20min。 

3、吸去固定液，晾干。 

4、于每孔中，加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液（Hoechst 33258 工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置 15～20min 或室温静置 20～30min。 

5、吸去 Hoechst 33258 工作液，用无菌水洗涤玻片 3 次，直接风干。风干后加入一滴封固液，并以盖玻片覆盖。 

6、荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。   

公司简介 

     北京索莱宝科技有限公司 始创于 2000年， 是一家集 产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。  公司总部位于北京，拥有1200平米研发生产中心，公司提供的产品近万种，超过5000种常备现货，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域，并不断推陈新出扩充种类，为用户提供优秀，专业的产品。  立足北京，辐射全国，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代理商，欢迎垂询并期待您的加入！