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流式试剂盒?
一键解析细胞亚群
SFCMZ-007 Mouse T-Subset Flow Kit
(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE)
基础介绍
流式细胞术（FCM），以流式细胞仪为检测工具，对悬液中的单细胞或其他生物粒子，结合免疫标记（偶联荧光素抗体）、光电转换等技术，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。在生命科学研究领域，细胞群体的精准分型与功能解析是探究疾病发生机制、评估免疫状态的核心环节。流式细胞术凭借其高灵敏度、多参数同步检测及单细胞分析能力，已成为细胞表型分析的关键技术。
T淋巴细胞（T lymphocyte）简称T细胞，来源于骨髓的多能干细胞，在胸腺中分化、发育成熟后，通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能。T细胞是一类关键的免疫细胞，主要根据其表面分子和功能分类。最常见的是CD4+ T细胞（辅助T细胞，调节免疫应答）和CD8+ T细胞（细胞毒性T细胞，直接杀伤感染细胞）。此外，还包括调节性T细胞（抑制免疫反应）、记忆T细胞（长期免疫记忆）、γδ T细胞（固有免疫样功能）等亚群，共同协调适应性免疫防御。
标志物：CD3e
表达细胞范围：所有成熟T细胞（胸腺细胞除外）
核心作用：构成TCR-CD3复合物，传递T细胞活化信号
免疫检测作用：判定总T细胞
标志物：CD4
表达细胞范围：辅助性T细胞、调节性T细胞等
核心作用：结合MHC Ⅱ类分子，辅助T细胞活化，调控免疫应答
免疫检测作用：判定辅助性T细胞亚群
标志物：CD8α
表达细胞范围：细胞毒性T细胞、部分记忆T细胞
核心作用：结合MHC Ⅰ类分子，介导CTL杀伤靶细胞
免疫检测作用：判定细胞毒性T细胞亚群
试剂盒三维数据卡
名称
Mouse T-Subset Flow Kit
(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE))
|
货号 |
SFCMZ-007 |
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规格 |
25T/50T/100T |
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交叉反应 |
Mouse |
|
应用 |
FCM |
｜试剂盒组分｜
|
产品编号 |
产品名称 |
100T/ 50T/25T |
推荐 使用量 |
|
SFCMZ-007A |
Anti-CD3e(FITC) Monoclonal Antibody |
1mL/ 0.5mL/0.25mL |
10μL/T |
|
SFCMZ-007B |
Anti-CD4(APC) Monoclonal Antibody |
1mL/ 0.5mL/0.25mL |
10μL/T |
|
SFCMZ-007C |
Anti-CD8a(PE) Monoclonal Antibody |
1mL/ 0.5mL/0.25mL |
10μL/T |
|
SFCMZ-007D |
Anti-Armenian Hamster IgG Isotype Control(FITC) Monoclonal Antibody |
0.1mL/ 0.1mL/0.1mL |
10μL/T |
|
SFCMZ-007E |
Anti-Rat IgG2b Isotype Control(APC) Monoclonal Antibody |
0.1mL/ 0.1mL/0.1mL |
10μL/T |
|
SFCMZ-007F |
Anti-Rat IgG2a Isotype Control(PE) Monoclonal Antibody |
0.1mL/ 0.1mL/0.1mL |
10μL/T |
实验相关
01
实验流程（仅供参考）
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1 |
取100 μL EDTA抗凝外周血，加到5 mL流式检测管底部； |
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2 |
加入2 mL 1×红细胞裂解液（推荐货号：R1010，红细胞裂解液），混匀后冰上孵育10 min，以裂解红细胞（观察溶液由鲜红色变为透亮，说明红细胞裂解完全）； |
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3 |
加入3 mL染色缓冲液（推荐货号：CA2490，流式染色缓冲液）混匀，终止裂解；将样本管以1000 rpm离心5 min，弃去上清液； |
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4 |
加入2 mL染色缓冲液重悬细胞，以1000 rpm离心5 min，弃去上清液； |
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5 |
加入60 μL染色缓冲液，依次加入CD3-FITC, CD8α-PE, CD45-PerCP, CD4-APC 各10 μL检测抗体（每1×106个细胞），混匀，室温避光孵育20 min； （注：根据待加入抗体量调整染色缓冲液的体积，使总体积为100 μL。例如，待加入10 μL检测抗体，则需加入90 μL染色缓冲液。） |
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6 |
加入2 mL染色缓冲液，以1000 rpm离心5 min，弃去上清液； |
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7 |
加入0.5 mL染色缓冲液重悬细胞，进行流式细胞术检测（若不能立即上机，可加入固定液后于4℃避光保存，建议24小时内上机）。 |
02
结果判定图
03
实验图片
Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), FSC-A.
Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.
Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.
Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.
相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
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R1010 |
红细胞裂解液 |
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CA2490 |
流式染色缓冲液 |
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