固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活,保存细胞原有形态、抗原、核酸结构,防止自溶、腐败、结构弥散。固定液主要分为三大类,其作用原理有所不同:
交联型固定液
以小分子单醛或二醛为主要成分。它们通过醛基与蛋白质分子间的氨基等基团形成共价交联网络,将生物大分子相互连接,从而稳定整体结构。
沉淀型固定液
以小分子醇、酮为主要成分。它们通过脱水作用,快速沉淀和凝固蛋白质,破坏蛋白质的疏水键和氢键,使其空间结构发生改变而凝固。
复合型固定液
以AAF固定液为例,由小分子醇(A)、有机酸(A)和小分子醛(F)组成,融合交联固定、沉淀脱水双重作用,兼顾快速固定与组织形态保护。
针对不同实验需求挑选适配的固定液,可充分保护样本结构与抗原、核酸等检测靶标,有效提升后续实验结果质量,接下来我们将根据样本适配性逐一介绍各类常用固定液!
第一类:通用型固定液
通用型固定液指适用范围广、兼顾常规形态染色、免疫检测的细胞或组织样本的固定试剂,部分货号产品经过RNase free处理,可以用于FISH实验及RNA原位检测。
1、产品介绍
2、效果展示
通用型固定液处理样本染色示例如下:
?固定:P1110
?染色:HE染色
?样本:小鼠常规组织石蜡切片(心/肝/脾/肺/肾/肠等)
?固定:G2310
?染色:番红-固绿染色
?样本:松针石蜡切片
第二类:专用型固定液
专用型固定液,是专门用于特殊组织或细胞样本的固定液,区别于通用型固定液,通过定制化专属配方可以有针对性的保护精细结构取得更好的组织形态,解决特殊样本组织形态差、间隙大等问题。
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2、效果展示
专用型固定液处理样本染色示例如下:
?固定:G2360
?染色:HE染色
?样本:小鼠眼球石蜡切片
?固定:G2365
?染色:HE染色
?样本:小鼠骨骼肌石蜡切片
第三类:酶活保护型固定液
酶活保护型固定液是一类专门用于酶组织化学、原位酶显色、冷冻切片酶学检测的固定液,含有钙、锌、镁等金属离子,可以稳定酶活中心。区别于普通醛类固定液,核心原则是可以避免强共价交联导致酶活性中心失活。
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酶活保护型固定液处理样本染色示例如下:
?固定:G2195
?染色:β-半乳糖苷酶染色
?样本:小鼠子宫内膜冰冻切片
第四类:电镜用固定液
电镜用固定液是专为透射电镜、扫描电镜样品制备设计的复合型固定试剂,以完整保存细胞超微精细结构(细胞膜、内质网、线粒体、微管等亚细胞结构) 为核心目标,兼顾蛋白质、脂质、核酸等生物大分子稳定,满足电子束高分辨率成像要求,区别于光镜普通固定液。
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