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| 产地 | 中国 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | P2060 |
| 用途 | rTEV 蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly 七氨基酸序列。 |
| 包装规格 | 1000u |
| 纯度 | 5U/ul% |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 否 |
| 有效期 | 2年 |
|---|---|
| 别名 | rTEV |
| 英文名称 | rTEV Protease |
| 储存条件 | -80℃，需加干冰运输。 |
| 酶活/效价 | 5U/ul |
| 外观（性状） | 无色透明液体 |
| 单位 | 支 |
rTEV 蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly 七氨基酸序列。rTEV 蛋白酶与肠激酶 U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO 等蛋白酶相比，具有高活性、高特异性的双重特点，rTEV 蛋白酶因具高剪切活性和特异性，已成为融合蛋白表达后去除融合 tag 的*蛋白酶。该酶经 6×His 标签纯化而得(含组胺酸标签)，纯度达99％， 剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除，以达到纯化目的蛋白的目的。
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
反应时间 | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4°C | 16°C | 21°C | 30°C | |
1 h | 34 | 58 | 56 | 70 |
2 h | 58 | 80 | 78 | 90 |
3 h | 71 | 99 | 99 | 99 |
3.5h | 84 | 99 | 99 | 99 |
影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/ml）、Pestatin A（1 mM），EDTA（1 mM）以及E-64（3 mg/ml），以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响；2）Zn离子（＞5 mM）对rTEV活性有抑制；3）与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。
表达方式: A DNA sequence encoding the TEV Protease （NP_062908） （Gly 2038- Gly 2280） was fused with polyhistidine tag at the N-terminus, with a Ser 2256 Asn mutation
种属:Human
表达宿主: E.Coli
QC Testing
纯度:> 95%, as determined by SDS-PAGE
内毒素:< ﹤1.0 EU per 1μg cytokine as determined by the LAL method.
稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt -70°C
预测N端: Met 1
分子量:The recombinant human TEV protease consists of 251 amino acids and has a predicted molecular mass of 28.6 kDa. As estimated in SDS-PAGE under reducing conditions.
缓冲液: Supplied as a 0.2μm filtered solution of 50mM Tris, 10%Sucrose,5mM DTT pH8.0
SDS-PAGE:
Usage Guide
储存方法:Store it under sterile conditions at -70℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage and usage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
使用方法说明：
1. 推荐使用溶液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中进行剪切。
2. 250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0
3. rTEV 蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例：1：100
4. 酶切体系：
融合蛋白 1000 μg
250×rTEV Protease Buffer 4μL
rTEV 蛋白酶 2μL
定容至 1000μL
定容缓冲液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl
5. 酶切条件：在 16℃酶切 6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件，可适当加大酶量或延长酶切时间。
6. 可取少量样本进行 SDS-PAGE 分析，若要去除酶切后体系中的 rTEV 蛋白酶，可用 His 标签纯化树脂亲和层析。
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参考文献：
《CRISPR-Cas9 Mediated RNase L Knockout Regulates Cellular Function of PK-15 Cells and Increases PRV Replication》 作者:Chao Sui, Dandan Jiang, Xiangju Wu, Xiaoyan Cong, Feng Li, Yingli Shang, Jinqiu Wang, Sidang Liu, Hu Shan, Jing Qi, and Yijun Du 期刊:BioMed Research International 影响因子:2.197 PMID:30941371
公司简介：
北京索莱宝科技有限公司 始创于 2000 年， 是一家集 产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。公司总部位于北京，拥有 1200 平米研发生产中心，公司提供的产品近万种，超过 5000 种常备现货，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域，并不断推陈新出扩充种类，为用户提供优秀，专业的产品。 立足北京，辐射全国，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代理商，欢迎垂询并期待您的加入！
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