透析袋使用说明

       透析即用半透膜 (  透析袋 )  将大分子蛋白质分离出来。在生物大分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品，透析法简便。透析时，小于 MWCO  的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下透过渗透析膜、其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的，透析袋以增加膜面只。常用温度 4 "C  ，升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器，均能提高透析速度。  

使用须知

1 .  某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。计有 :  

卤化   烃   、醇、   酮   、   酯，   酸 (  甲酸、   乙   酸、稀强酸如 5%HCL ) , 10%   萘酚   ，  30% 双氧水。  

甲醇、   乙醇   : 浓度小于 5%  时，透析袋功能在，而 MWCO 变化。  

2  蛋自质   吸附   量， 小于 1   ug   / 克 (  以透析袋干重计 ) 。正常使用 PH 值 5-9 C  可重复使用 )  。  

极限使用 PH 值 2-12 C  一次性使用 )  。  

3.  前处理 :  煮沸 5 分钟后用蒸饱水 60   ℃    冲洗 2 分钟，置于 4    ℃    蒸锚水中待用。长期保存液 0.05%-0.1%   叠氮钠   ，  1mMEDTA 或 50% 甘油，温度   4 ℃    ， 使用前以   蒸馏水   洗净。

4  即用型透析袋无须前处理，使用前用   蒸馏水洗净即可。

5  透析袋装液时应留 1/3-1/2 空间， 以防透析过程中，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋   胀破，含   盐量高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加 50%  系正常情况 )  。  

6  使用时需带手套。  

7  透析效果检查用  

1% 氯化领检查硫酸按、硫酸   钠

1% 硝酸银检查氯化   钠、氯化钾

压扁宽度34mm 透析分子量8000-14000D   长度5米

使用前处理：

1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。

参考文献：

《Characterization of novel exopolysaccharide of Enterococcus faecium WEFA23 from infant and demonstration of its in vitro biological properties》 作者:Kaiying Jia,Xueying Tao,Zhengqi Liu,Hui Zhan,Weijun He,Zhihong Zhang,Zheling Zeng,Hua Wei 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:3.909 PMID:30594615

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透析袋的处理

       分子在半透膜间的分离是由膜两侧溶液的浓度差驱动的，受相对于膜内微孔尺寸的分子大小 ( 分子质量 ) 的限制。微孔尺寸决定着截留分子质量，截留分子质量的定义是当 90%  的溶质分子可被膜截留时的分子质量。实际某一溶质的通透性不仅取决于分子的大小，还取决于分子的形状、分子的水化程度及其所带的电荷。这些参数均受溶剂的性质、 pH  以及离子强度的影响。因此截留分子质量只能作为参考，而不能*地用来预测在各种溶质和溶剂下的透析行为。透析膜孔径范围很大 ( 从 100Da  到 2000kDa ).  在透析大多数质粒 D NA 和许多蛋白质时，截留分子质量在 12000-14 000Da  之间比较适合。  

(1) 将透析管剪成适当的长度 ( 10   -   '20cm)  的小段，即形成透析袋。  

( 2 )  在大体积的 2% (m/ V)  碳酸氢   钠   和 lmmol / L EDTA (pH8. 0 )  中将透析袋煮沸 10min  。  

(3)  将透析袋用   蒸馏水   彻底漂洗。

(4)  将透析袋置 lmmol / L EDTA ( pH8 . 0 )  中煮沸 10min.  

( 5 )  待透析袋冷却， 存放于 4   ℃    ，应确保透析袋始终浸没在液体中。

（   重要 : 从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。   ）

( 6 )  在使用之前要用   蒸馏水   将透析袋里外加以清洗。

【   注   】

也可将透析袋放在广口瓶中充满水， 松动瓶盖， 于 2 0p s i    （   l .40kg / c m 2 )  高压灭菌 10 m i n  ，代替第 4  步用 lmmol / L EDTA ( pH8 . 0 )  中煮沸 10mi  日的操作。  

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