大鼠白介素 4 ELISA 试剂盒
产品编号#：SEKR-0004
适用于大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本

背景介绍：
白细胞介素4是由活化的T淋巴细胞、肥大细胞产生，在免疫应答过程中具有多效性，成熟IL-4分子量为18-19KD的糖蛋白，大鼠IL-4前体蛋白含有24个氨基酸残基的信号肽，成熟的大鼠IL-4蛋白序列与牛、人和小鼠的IL-4分别具有41%、43%和59%的序列同一性，IL-4的生物学活性包括：促使抗原或丝裂原活化的B细胞分裂增殖;促进Tc细胞的活性; IL-4可增强巨噬细胞的功能; IL-4与IL-3协同可维持和促进肥大细胞的增殖;可与CSF协同作用，促进骨髓造血前体细胞的增殖，诱导髓样细胞定向分化;诱导内皮细胞表达血管细胞粘附子-1(VCAM-1)，对淋巴细胞的迁移具有一定意义

检测原理：
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗大鼠 IL-4 单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的大鼠 IL-4 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠 IL-4 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠 IL-4，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；*，在 λmax=450nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的大鼠 IL-4 浓度与 OD 成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠IL-4 的浓度。

注意事项：※※※
1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。
3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。
5. 为避免交叉污染，请在试验中使用 1 次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。.
6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上，使用前请离心处理（5-10 S 即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹打几次。
7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。
8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

安全提示：试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规定执行。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。

※注意：血清血浆样本避免使用溶血、高血脂样本，以免影响检测结果；如果样本中的靶标物检测浓度高于标准品的*值，请将样品做适当倍数稀释后检测，建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。

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