大鼠基质金属蛋白酶 9ELISA 试剂盒

产品编号：SEKR-0027

适用于大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本

背景介绍：

基质金属蛋白酶，基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要 Ca、Zn 等金属离子作为辅助因子而得名。其家族成员具有相似的结构，一般由 5 个功能不同的结构域组成 :(1)疏水信号肽序列;(2)前肽区，主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后，MMPs 酶原被激活;(3)催化活性区，有锌离子结合位点，对酶催化作用的发挥至关重要;(4)富含脯氨酸的铰链区;(5)羧基末端区，与酶的底物特异性有关。基质金属蛋白酶 9（MMP-9）是人体内最重要的蛋白酶之一，属于基质金属蛋白酶超家族成员中明胶酶的一种，又称明胶酶 B，其主要功能是分解细胞外基质，参与人体许多生理及病理过程，该因子在基质金属蛋白本科组织抑制剂（TIMPs）等，其作用底物主要是Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原，明胶及弹性纤维。 

检测原理：

Solarbio (Solarbio ®)ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗大鼠 MMP-9单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的大鼠 MMP-9会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗大鼠 MMP-9 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠 MMP-9 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠 MMP-9，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；*，在λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的大鼠MMP-9 浓度与 OD 成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠 MMP-9 的浓度。

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