产品名称: 葡萄糖含量检测试剂盒 微量法

产品英文名:

产品货号：BC2505          产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：100管/96样          产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：1560
库存状态：现货                          
关键字: 葡萄糖检测试剂盒|葡萄糖含量检测试剂盒|葡萄糖|试剂盒

简要介绍：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的*能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
    葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505 nm 有特征吸收峰。

产品详细描述
产品内容：
试剂一：0.5μmol/mL 葡萄糖溶液10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
产品说明：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的*能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505 nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。
操作步骤：
一、葡萄糖提取：   
组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 蒸馏水），研磨成匀浆，95℃水浴10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。
细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 蒸馏水），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3S，间隔10S，重复30 次），95℃水浴10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。

• 测定操作表：

1. 分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。

2. 混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三1:1 等体积混合，用*配*。

3. 加样表（在EP 管/96孔板中加入下列试剂）：

混匀，置37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴中，保温15min，于505nm 波长处读取吸光度。空白管、标准管和测定管吸光值分别记为A1、A2 和A3。空白管和标准管只要做一管。

葡萄糖含量计算： 

1. 按样本蛋白浓度计算

葡萄糖含量(μmol/mg prot)=(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)
=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)÷Cpr。

2. 按样本鲜重计算

葡萄糖含量（μmol/g 鲜重）= (C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)
=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W

3. 按细菌或细胞密度计算

葡萄糖含量（μmol/ 10⁴ cell)= (C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(500×V1÷V2)
=0.001×(A3-A1)÷(A2-A1)
C 标准：标准管浓度，0.5μmol/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
注意：*检测限为50nmol/g 鲜重或0.5nmol/mg prot


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