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| 产地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | BC0740 |
| 用途 | |
| 英文名称 | Hexokinase (HK) kit |
| 包装规格 | |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 保质期 | 1年 |
| 是否进口 |
产品规格：50管/48样 产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存； 参考价格：620
库存状态：现货 关键字：己糖激酶试剂盒|活性检测试剂盒|己糖激酶活性检测|试剂盒简要介绍：
HK广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm有特征吸收峰。产品详细描述产品内容：
提取液：液体60mL× 1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体30mL× 1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂× 1 瓶，4℃保存； 临用前加入30mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂三：液体5 mL× 1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支，- 20℃保存，用时每支加4mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
试剂五：粉剂×1支，- 20℃保存；用时每支加2mL 双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
试剂六：粉剂×1支，-20℃保存；用时每支加250μL试剂一和250μL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存一周；
产品说明：
HK广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm有特征吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的准备：
细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5-10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作：
分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
将试剂一、二、三、四和五置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）预热10min。
加样表
| 试剂名称(μL) | 测定管 |
| 试剂一 | 400 |
| 试剂二 | 400 |
| 试剂三 | 80 |
| 试剂四 | 80 |
| 试剂五 | 40 |
| 试剂六 | 8 |
| 样本 | 30 |
将上述试剂按顺序加入1mL 石英比色皿中，立即混匀，加样本的同时开始计时，在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴或恒温箱中，准确反应5分钟；迅速取出比色皿并擦干，340 nm下比色，记录5分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意事项：
如果一次性测定样本数较多，可将试剂一、二、三、四、五、六按比例配成混合液，预热10min。
比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
*两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
不同匀浆组织中HK 活力不一样，做正式试验之前请做1- 2 只预试，若ΔA> 0.5，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液（计算公式中乘以相应稀释倍数），或缩短反应时间至2min，使ΔA< 0.5，以提高检测灵敏度。
HK活性计算：
血清（浆）HK活力的计算：
单位的定义：每毫升血清（浆）在每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
HK（U/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=1113×ΔA
组织、细菌或细胞中HK活力计算：
按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
HK（U/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1113×ΔA÷Cpr
按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
HK（U/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=1113×ΔA÷W
按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
HK（U/104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=2.226×ΔA
V反总：反应体系总体积，1.038×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.03 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
相关文献：
《Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance》 作者:Jing Li，Yabing Duan，Chuanhong Bian，Xiayan Pan，Chengjie Yao，Jianxin Wang，Mingguo Zhou 期刊:Pesticide Biochemistry and Physiology 影响因子:2.87 PMID:30744889
《Galangin and Pinocembrin from Propolis Ameliorate Insulin Resistance in HepG2 Cells via Regulating Akt/mTOR Signaling》 作者:Yinkang Liu, Xiali Liang,Gensheng Zhang,Lingjie Kong,Wenjun Peng and Hongcheng Zhang 期刊:Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 影响因子:1.984 PMID:30420897
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