产品名称: β-淀粉酶活性检测试剂盒

产品英文名:  β-amylase Assay Kit

产品货号：BC2040       产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：50管/24样     产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：830
库存状态：现货                          
关键字: 淀粉酶检测试剂盒|β-淀粉酶检测试剂盒|β-淀粉酶|试剂盒

简要介绍：
淀粉酶负责水解淀粉，主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。   
    还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。
 
产品详细描述
产品内容：
试剂一：50mL×1 瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需90℃加热溶解后再用；
试剂二：40mL×1 瓶，4℃保存。若有沉淀析出，需70℃加热溶解后再用。

产品说明：
淀粉酶负责水解淀粉，主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。   
还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。 

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。 

操作步骤：
一、粗酶液提取：  
称取 0.1~0.2g 样本（建议称取约 0.1g 样本），加入 1mL 蒸馏水，研磨匀浆；将匀浆倒入离心管中，提取液在室温下放置提取 15min，每 5min 振荡 1 次，使其充分提取；3000g，25℃离心 10min，取上清液加蒸馏水定容至 10 mL，摇匀，即淀粉酶原液。 
吸取上述淀粉酶原液 1mL，加入 4mL 蒸馏水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α＋β）淀粉酶总活力的测定。 
二、测定步骤：  

1. 分光光度计预热 30min 以上，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。 

2. 试剂一或试剂二40℃预热10min。

3. 测定操作表： 

混匀，95℃水浴5min，冷却，在540nm 下测定吸光度，从左到右分别记为A1、A2、A3 和A4。


三、酶活性计算： 
1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778；  x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 
2、α-淀粉酶活性 
（1）按照样本质量计算 
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。 
α-淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=[(A2-A1＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=1.075×(A2-A1＋0.1778)÷W
（2）按照蛋白质含量计算 
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。 
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(A2-A1＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷（V 样×Cpr）÷T
=0.1075×(A2-A1＋0.1778) ÷Cpr