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| 产地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | BC3290 |
| 保存条件 | 2-8℃保存 |
| 英文名称 | Binding starch synthase (GBSS) test kit |
| CAS编号 | |
| 保质期 | 1年 |
产品规格：50管/48样 产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存； 参考价格：3000
库存状态：现货
关键字: 结合态淀粉合成酶检测试剂盒|GBSS检测试剂盒|结合态淀粉合成酶|试剂盒
简要介绍：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。
GBSS 催化ADPG 与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP；进一步通过反应体系中添加的丙tong酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，其中NADPH 生成量与前一步反应生成的ADP 数量呈正比，通过340nm 下测定NADPH 的增加量，可以计算GBSS 活性。
产品详细描述
产品内容：
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每支加入7mL试剂一。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前每支加入5mL试剂一。
试剂五：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前每支加入8mL试剂一。
试剂六：粉剂×1支，-20℃保存；临用前加入500μL双蒸水，充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存；
试剂七：液体250μL×1支，-20℃保存；
试剂八：液体12.5μL×1瓶；每支临用前加入溶解好的4mL试剂四
反应液Ⅰ的配制：临用前在试剂二中加入7mL试剂一，缓慢加热，逐渐升温使其溶解，冷却后加入试剂三混合溶解。这样可以分两批配制并且测定。
产品说明：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成ADP；进一步通过反应体系中添加的丙tong酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH，其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比，通过340nm下测定NADPH的增加量，可以计算GBSS活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液制备
称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。10000g ，4℃离心10min，弃上清，在沉淀中加入1mL提取液充分混匀，置冰上待测。
二、测定步骤
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 样本 | 200 |
| 试剂二 | 270 |
| 混匀，30℃保温20 min，置沸水浴中1 min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却 | |
| 试剂三 | 150 |
| 混匀，30℃保温30 min，置沸水浴中1 min（盖紧，防止水分散失）， 冰浴冷却，10000g 常温离心10min，取上清液 | |
| 上清液 | 450 |
| 试剂四 | 300 |
| 试剂五 | 15 |
| 试剂六 | 15 |
混匀后立即在340 nm波长下记录初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意：试剂二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混匀。
三、GBSS活性计算
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在1mL反应体系中每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GBSS活性（U/mg prot）＝ΔA×（V反应体系÷1mL）÷T÷ε÷d÷（Cpr×V样本×V上清÷（V样本+V试剂二+V试剂三））=432×ΔA÷Cpr。
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
