产品名称:：硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名：Micro Oxidized Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit

产品货号：BC1155        产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：100管/96样           产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：810
库存状态：现货                          
关键字：硫氧还蛋白氧化还原酶试剂盒|活性检测试剂盒|TrxR活性检测|试剂盒|微量法

简要介绍：
TrxR 是一种NADPH 依赖的包含FAD 结构域的二聚体硒酶，属于吡dian核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及NADPH 共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR 与GR 活性类似，催化GSSG 还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。
    TrxR 催化NADPH 还原DTNB 生成TNB 和NADP+，TNB 在412 nm 有特征吸收峰，通过测定412nm 波长处TNB 的增加速率，即可计算TrxR 活性。

产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体120mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃ 避光保存。临用前加入2mL蒸馏水溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃ 避光保存。临用前加入2mL蒸馏水溶解。
试剂四：液体×1支，-20℃避光保存。
产品说明：
    TrxR是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶，属于吡dian核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似，催化GSSG还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。
    TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP⁺，TNB在412 nm有特征吸收峰，通过测定412nm波长处TNB的增加速率，即可计算TrxR活性。
自备仪器和用品：
    低温离心机、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、称约0.1g样品，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清液待测。
2、细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴ 个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3 s，间隔7s，总时间3min），然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
    测定前将上清液与试剂四以50：1的体积比混匀（即取100μL上清液加入2μL试剂四混合）37℃水浴30min后至冰上。
二、TrxR测定操作：
1. 分光光度计或酶标仪预热30 min后，调节波长到412nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂一在25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）预热30min。
3. 空白管：取微量玻璃比色皿或96孔板，加入20μL试剂二，20μL试剂三，160μL试剂一，迅速混匀后于412 nm测定10 s时的吸光度，37℃水浴5min迅速拿出测量412nm下的吸光度记为A1和A2。计算△A空白管=A2-A1。
4. 测定管：取微量玻璃比色皿或96孔板，加入20μL试剂二，20μL试剂三，140μL试剂一，20μL上清液，迅速混匀后于412 nm测定10 s时的吸光度，37℃水浴5min迅速拿出测量412nm下的吸光度，记为A3和A4。△A测定管=A4-A3。