产品名称:：γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)活性检测试剂盒

产品英文名：Thioredoxin Peroxidase (TPX) Assay Kit

产品货号：BC1210              产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：50管/48样          产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：630
库存状态：现货                          
关键字：γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶试剂盒|活性检测试剂盒|GCL含量检测|试剂盒|

简要介绍：
GCL （glutamate cysteine ligase）是 GSH 合成的限速酶，GSH 对 GCL 有反馈抑制作用。GCL基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。
在ATP和Mg²⁺存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。
 

产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加14mL蒸馏水充分震荡溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入蒸馏水3.5 mL充分震荡溶解。
试剂四：液体16mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入30mL蒸馏水，充分震荡溶解后，缓缓加入1.0 mL浓硫酸（自备），边加边搅拌。
标准品：液体1mL×1支，4℃保存。1μmol/mL 磷标准溶液。
产品说明：
GCL （glutamate cysteine ligase）是 GSH 合成的限速酶，GSH 对 GCL 有反馈抑制作用。GCL基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。
在ATP和Mg²⁺存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、冷冻离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
二、GCL测定操作

1. 分光光度计预热30min，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。

2. 将标准液稀释10倍，即稀释成0.1μmol/mL 磷标准溶液