简要介绍：
FC是构成细胞膜的主要成分，也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。 
    FC氧化酶催化FC生成△4-胆甾烯酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物，在500nm有吸收峰，其颜色深浅与FC含量成正比。 

产品详细描述
产品内容：
试剂一：异丙醇100mL（自备）；
工作液：液体20mL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，浓度为0.5 μ mol/mL，4℃保存。

产品说明：
FC是构成细胞膜的主要成分，也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。
FC氧化酶催化FC生成△4-胆甾烯酮和H₂O₂，过氧化物酶催化H₂O₂、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物，在500nm有吸收峰，其颜色深浅与FC含量成正比。

自备仪器和用品：
水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。

操作步骤：
一、样品中FC提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声2秒，间隔3秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

3. 血清（浆）样品：直接测定

• 测定：

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到500 nm，蒸馏水调零。

2. FC工作液在40℃水浴中预热30min。

3. 标准管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC标准液和150μL FC工作液，混匀，静置24h后于500nm测定A标准管。

4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC待测液和150μL FC工作液，混匀，静置24h后于500nm测定A测定管。

三、FC含量计算：

1. 血清（浆）中FC含量计算： 

FC含量（μmol/dL）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）×100mL
=100×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）
    C标准液：1μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。 

2. 组织中FC含量计算： 

1. 按样本蛋白浓度计算 

FC含量（μmol/mg prot）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr
=（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr

2. 按样本鲜重计算 

FC含量（μmol/g 鲜重）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）×V样总÷W
=（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷W
    C标准液：1μmol/mL；V样总：加入提取液的体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

3. 细胞、细菌中FC含量计算：

FC含量(μmol/10⁴cell)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(10⁴ cell/mL)
= (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(10⁴cell/mL)
    C标准液：1μmol/mL。
注：检测下限：0.25μmol/mL

相关文献：

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