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产地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
货号 | BC2715 |
用途 | |
英文名称 | Total sugar content test kit |
包装规格 | |
纯度 | % |
CAS编号 | |
保质期 | 1年 |
是否进口 |
产品内容:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存;
标准品:粉剂×1 支,10mg 无水葡萄糖,4℃保存;临用前加 1mL 蒸馏水溶解为 10mg/mL 的葡萄糖标准品备用。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、蒸馏水。
操作步骤:
一、样品中总糖的提取:
组织:称取约 0.1g 样品,加入 1mL 试剂一,1.5mL 蒸馏水,匀浆,沸水浴 30min,加入 1mL
试剂二,混匀,用蒸馏水定容至 10mL,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
血清(浆)、液体体积:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.1mL 试剂一,0.15mL 蒸馏水,匀浆,沸水浴 30min,加入 0.1mL 试剂二,混匀,用蒸馏水定容至 1mL,8000g 25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
二、测定操作表:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 1.5、1、0.8、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1mg/mL。
3、加样表:
试剂(μL) 空白管 测定管 标准管
蒸馏水 30
样本 30
标准品 30
试剂三 30 30 30
混匀,沸水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水 180 180 180
混匀,取出 200μL 在 540nm 下测定吸光值,并计算?A 测=A 测定管-A 空白管、?A 标=A 标准管-A 空白管。
三、总糖含量计算:
1、标准曲线的绘制:
以标准管的浓度为x轴,对应的?A标为y轴绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将?A测带入方程中计算得x(mg/mL)。
2、按样本鲜重计算:
总糖(mg/g 鲜重)=(x×V 样总)÷W×稀释倍数=10×x÷W×稀释倍数
3、按血清(浆)、液体体积计算:
总糖(mg/mL)=(x×V 提)÷V 样×稀释倍数=10×x×稀释倍数
V 样总:组织样本总体积,10mL;
W:样本鲜重,g;
V 提:血清或液体样本总体积,1mL;
V 样:血清或液体体积,0.1mL。
注意事项:
1、空白管只需做一管。
2、如果?A 大于 1.2,需要将上清液用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。
3、此试剂盒对于纤维素的分解程度无法达到 100%。
注意:*检测限为 5mg/g 鲜重。
相关文献:
《Tolerance of Ruppia sinensis Seeds to Desiccation, Low Temperature, and High Salinity With Special Reference to Long-Term Seed Storage》 作者:Ruiting Gu, Yi Zhou, Xiaoyue Song, Shaochun Xu, Xiaomei Zhang, Haiying Lin, Shuai Xu, Shidong Yue, and Shuyu Zhu 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:5.36 PMID:29628930