植物叶绿素含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
英文名称：Plant chlorophyll content detection kit
关键词：植物叶绿素|植物叶绿素含量检测|叶绿素含量|
货号：BC0990
规格：50T/48S

产品内容：
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。

产品说明：
植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植物生长状况的重要指标。
叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有*吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素含量。

自备实验用品及仪器：
天平、研钵、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、10mL玻璃试管，锡箔纸、无水乙醇、丙tong。

操作步骤：
1. 称取约新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉，称取约0.1g，剪碎，用蒸馏水洗干净。
2. 提取液的准备：取200mL无水乙醇和400mL丙tong，充分混匀待用。
3. 加入1mL蒸馏水，少量试剂一（约10mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL玻璃试管。
4. 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入玻璃试管，用提取液定容至10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
5. 取浸提液1mL于1mL玻璃比色皿，提取液调零，测定663nm和645nm处吸光值，分别记为A663和A645 。

计算公式：
叶绿素a含量（mg/g）=（12.7×A663 – 2.69 ×A645）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（12.7×A663 – 2.69 ×A645）×D÷m
叶绿素b含量（mg/g）=（22.9×A645 – 4.68 ×A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（22.9×A645 – 4.68 ×A663）×D÷m
叶绿素总含量（mg/g）=（20.21×A645 +8.02 ×A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（20.21×A645 +8.02 ×A663）×D÷m
V提：提取液体积，10mL；D：稀释倍数；m：样本质量，g

注意事项：
1. 叶绿素对光敏感，研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。
2. 一定要浸提至组织残渣完全变白，否则提取不充分。
3. 用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至玻璃试管。
4. 测定时吸光值超过1，可进行适当稀释。

相关文献：

《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影响因子:3.537 PMID:30048775