植物硝态氮测试盒说明书
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
英文名称：Plant nitrate nitrogen content detection kit
关键词：植物硝态氮|植物硝态氮检测|硝态氮
分光光度法
货号：BC1500
规格：50 管/48 样
产品说明：
试剂一：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 2mL 浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 支，4℃保存。
产品说明：
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤：
一、样本处理
按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min，期间不断晃动或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min，待冷却后于 25℃，12000g 离心 15min，取上清待测。（深色植物匀浆后加入约 3mg试剂三后再提取）
二、测定操作表
空白管 测定管
样本（μL）             20
蒸馏水（μL）     20
试剂一（μL）     80    80
充分混匀，25℃静置 30min
试剂二（μL）    1900   1900
混匀，25℃静置 5min，取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿中测定 410nm处吸光值 A，△A=A 测定管-A 空白管
注意：空白管只需测定一次。
三、计算公式
标准曲线：y=0.633x-0.0397，R2=0.9997
NO3- N 含量（μg/g）=（△A+0.0397）÷ 0.633×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）= 158×（△A+0.0397）÷W
V 反总：反应总体积，2mL；
V 样：反应体系中加入样本体积，0.02mL；
V 样总：加入提取液体积，1mL，
W：样本质量，g
注意事项
1. 试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。
2. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。
3. *检出限为 62.8μg/g。

相关文献：

《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影响因子:3.537 PMID:30048775