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乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒 微量法 BC0755
  • 品牌:Solarbio
  • 产地:北京
  • 货号:BC0755
  • 发布日期: 2019-12-06
  • 更新日期: 2025-07-04
产品详请
产地 北京
品牌 Solarbio
货号 BC0755
用途
英文名称 Acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activity detection kit
包装规格
纯度 %
CAS编号
保质期 1年
是否进口

产品名称:乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒 微量法

产品英文名:  Micro Acetaldehyde Dehydrogenase (ALDH)Assay Kit

产品货号:BC0755               产地:北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格:100管/96样        产品商标:solarbio
保存与运输:4保存或-20保存;            参考价格:1440
库存状态:现货                          
关键字:乙醛脱氢酶试剂盒|活性检测试剂盒| ALDH活性检测|试剂盒|微量法

简要介绍:
乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种,广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸,在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注;同时,乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。在辅酶Ⅰ存在的条件下,乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH,在340nm 处的吸光值会增加,测定340nm 处的吸光值变化,可计算得到乙醛脱氢酶的活性。

产品详细描述

商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
BC0755-100管/96样Solarbio 100管/96样1440.00元


产品内容: 
提取液:液体100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体2mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体1mL×1 支,4℃避光保存。
试剂四:液体1mL×1 支,4℃保存。
试剂五:液体1mL×1 支,4℃保存
产品说明:
乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种,广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要 作用是将乙醛氧化成乙酸,在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶 能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注;同时,乙醛脱氢 酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。 在辅酶Ⅰ存在的条件下,乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH,在340nm 处的吸 光值会增加,测定340nm 处的吸光值变化,可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
自备实验用品及仪器: 天平、离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、蒸馏水。

操作步骤: 
ALDH 提取:

  1. 组织:

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000rpm, 4℃离心 20 分钟。

  1. 细胞:

按照细胞数量(10 4个):提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细菌或细胞(功率 30%或 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒。总时间 3min);10000rpm, 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。

测定操作


对照管测定管
样本(μL)
40
试剂一(μL)6060
试剂二(μL)2020
试剂三(μL)1010
试剂四(μL)1010
试剂五(μL1010
H2O(μL)9050

充分混匀,1mL 石英比色皿,对照管调零,于340nm 处测定吸光值A1,迅速置于37℃水浴1min, 于340nm 处测定吸光值A2,△A= A1-A2。
ALDH 酶活计算
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1) 按蛋白浓度计算
酶活定义:每毫克蛋白每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/mg prot)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样×Cpr)÷T=804×△A÷Cpr
2) 按样本质量计算
酶活定义:每克样品每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/g)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T=804×△A÷W
3) 按照细胞数量计算
酶活定义:每10 4个细胞每分钟催化还原1μmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/10 4 cell)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量(万个))÷T =804×△A÷细胞数量(万个)
4)按液体体积计算
酶活定义:每毫升液体每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1U。
ALDH 酶活(U/mL)=△A÷(?× d) ×V反总÷V样÷T=804×△A
? NADH 微摩尔消光系数,6.22×10 -3 L/μmol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应体 系总体积,0.2mL;V 样:反应体系中样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr: 样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间:1min。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下
1)按蛋白浓度计算
酶活定义:每毫克蛋白每分钟催化还原 1nmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/mg prot)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样×Cpr)÷T=1608×△A÷Cpr
2) 按样本质量计算
酶活定义:每克样品每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/g)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T=1608×△A÷W
3) 按照细胞数量计算
酶活定义:每10 4个细胞每分钟催化还原1μmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活(U/10 4 cell)=△A÷(?× d) ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量(万个))÷T =1608×△A÷细胞数量(万个)
4)按液体体积计算
酶活定义:每毫升液体每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1U。
ALDH 酶活(U/mL)=△A÷(?× d) ×V反总÷V样÷T=1608×△A
? NADH 微摩尔消光系数,6.22×10 -3 L/μmol /cm;d:96 孔板光径,0.5cm;V 反总:反应 体系总体积,0.2mL;V 样:反应体系中样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr: 样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间:1min。


相关文献:

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《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin  期刊:Biotechnology for Biofuels 影响因子:5.452 PMID:

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