产品说明： β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆 境条件下，可诱导细胞大合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理 研究。 β-1,3-GA 水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率， 来计算其酶活性。
自备仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏 水。
操作步骤： 一、粗酶液提取： 组织：按照组织质（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000g 4℃离心 10min， 取上清，置冰上待测。

β-1,3-GA 活性计算： 根据标准管吸光度 x（A 标准管-A 空白管）和浓度（y，mg/mL）建立标准曲线，将?A 带入公 式中计算出样品中产生的还原糖的含 y 值（mg/mL） （1） 按蛋白浓度计算 单位的定义： mg 组织蛋白小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr （2） 按样本鲜重计算 单位的定义： g 组织小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/g 鲜重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W (3) 按细菌或细胞数计算 单位的定义： 1 万个细胞或细菌小时产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。 β-1,3-GA(U/104 cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y V1：加入反应体系中样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度， mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，万。

相关文献：

《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影响因子:0.967 PMID:

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