产品内容：

 提取液：液体 30mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 8mL×1 瓶， 4℃保存； 试剂二：液体 8mL×1 瓶， 4℃保存； 试剂三：液体 80mL×1 瓶，4℃保存； 标准品：液体 1mL×1 支，20μmol/mL 丙酮酸钠标准品，4℃保存。

产品说明： 

GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基 酸代谢的重要酶。此外，GOT 在心肌细胞中含量*，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅 助检查。*损害时其血清浓度也可升高。 GOT 催化 α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一 步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与 2,4-二硝基苯肼反应生成 2,4-二硝基苯腙，在碱性条件下显棕 红色；测定 505nm 吸光度的变化，即可计算 GOT 酶活力。

实验需自备的仪器和用品：

 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

计算 

1、标准曲线的绘制：

 以各标准溶液浓度为 x 轴，以?A（A 标准管-A 空白管）为 y 轴做标准曲线，得到方程 y=kx+b。

 将 （A 测定管-A 对照管）带入方程求 x 值。

 2、GOT 活性计算： 

（1）按样本鲜重计算：

         单位定义：每小时每 g 鲜重样品催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。                          GOT（U/g 鲜重）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（W×V 样本÷V 样总）÷T=12x÷W。 

（2）按样本蛋白浓度计算：

         单位定义：每小时每 mg 组织蛋白催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。                       GOT（U/mgprot）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（Cpr×V 样本）÷T=12x÷Cpr。 

（3）按血清体积计算： 

         单位定义：每小时每 mL 血清样品催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。                        GOT（U/mL）=x×（V 样本+V 试剂一）÷V 样本÷T=12x。 （

4）   按细胞数量计算： 

        单位定义：每小时每 104个细胞样品催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。                                        GOT（U/104cell）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（V 样本÷V 样总×500）÷T=0.024x。           V 样本：吸取样本体积，0.02mL；V 试剂积，1mL；W：样本鲜重，g；Cpr：样本蛋白质浓度，         mg/mL；T：反应时间，0.5h；500：细胞 数量或微生物数量，500 万。