产品内容：

 提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。 试剂一：液体 3.5 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 3.5 mL×1 瓶，4℃保存； 试剂三：液体 30 mL×1 瓶，4℃保存； 标准品：液体 1mL×1 支，20μmol/mL 丙酮酸钠标准品，4℃保存。

产品说明：

 GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸 代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞 GPT 活性很高，当肝细胞坏死，GPT 释放到血液中，血清 GPT 活 性显著增高。因此，GPT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入 2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止 上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在 505nm 读取吸光值 并计算酶活力。

试验中所需的仪器和用品：

 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏 水。

计算 

1、标准曲线的绘制：

 以各标准溶液浓度为 x 轴，以?A（A 标准管-A 空白管）为 y 轴做标准曲线，得到方程 y=kx+b。将（A 测定 管-A 对照管）带入方程求 x 值。

 2、GPT 活性计算： 

（1）按样本鲜重计算： 

         单位定义：小时 g 样品催化产生 1μmol 丙酮酸的为一个 GPT 活力单位。                                              GPT（U/g 鲜重）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（W×V 样本÷V 样总）÷T=12x÷W。 

（2）按样本蛋白浓度计算： 

         单位定义：小时 mg 组织蛋白催化产生 1μmol 丙酮酸的为一个 GPT 活力单位。

         GPT（U/mg prot）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（Cpr×V 样本）÷T=12x÷Cpr。   

（3）按血清（浆）体积计算： 

         单位定义：小时 mL 血清（浆）样品催化产生 1μmol 丙酮酸的为一个 GPT 活力单位。                        GPT（U/mL）=x×（V 样本+V 试剂一）÷V 样本÷T=12x。 

（4）按细胞或细菌数计算： 

         单位定义：小时 104个细胞或细菌催化产生 1μmol 丙酮酸的为一个 GPT 活力单位。                            GPT（U/104 cell）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（500×V 样本÷V 样总）÷T=0.024x。                            V 样本：样本体积，0.005mL；V 试剂一：试剂一体积，0.025mL；V 样总：提取液体积，                 1mL；W：样本鲜 重，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；T：反应时间，0.5h；500：细胞或           细菌总数，万。

相关文献：

《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影响因子:5.646 PMID:30373678