产品内容：

 提取液：液体 55mL×1 瓶，4℃保存。 试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 4mL 蒸馏水溶解。 试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 4mL 提取液，沸水浴中磁力搅拌溶解。 试剂三：液体 20ml×1 瓶，4℃保存。 试剂四：液体 4mL×1 瓶，4℃保存。 标准品：液体 1ml×1 支，0.25μmol/mL 标准酪氨酸溶液，4℃保存。

产品说明： 

ACP 是一种在酸性环境下催化蛋白质水解的酶。该酶主要用于酒精发酵、啤酒酿造、毛 皮软化、果酒澄清、酱油酿造、饲料等。 酸性条件下，ACP 催化酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合 物生成钨蓝；钨蓝在 680nm 有特征吸收峰，通过测定其吸光度增加，来计算 ACP 活性。

试验所需自备用品：

 研钵、台式离心机、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微 量玻璃比色皿/96 孔板、1.5mLEP 管和蒸馏水。

ACP 活性计算： （1）按蛋白浓度计算 ACP 活性单位（U）定义：30℃每毫克蛋白每分钟催化水解产生 1μmol 酪氨酸 酸性蛋白酶活性（U/mgprot） =C 标准品×（A 测定－A 对照）÷（A 标准－A 空白）×V1÷（Cpr×V2）÷T =0.125×（A 测定－A 对照）÷（A 标准－A 空白）÷Cpr （2）按样本鲜重计算 AP 活性单位（U）定义：30℃每克样品每分钟催化水解产生 1μmol 酪氨酸。 AP 活性（U/g） =C 标准品×（A 测定－A 对照）÷（A 标准－A 空白）×V1÷（W×V2÷V3）÷T =0.125×（A 测定－A 对照）÷（A 标准－A 空白）÷W C 标准品：0.25μmol/mL 标准酪氨酸溶液；Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL）；W：样品 质量（g）；V1：酶促反应总体积（mL），0.1mL； V2：加入反应体系中粗酶液体积（mL），2 ×10-2mL；V3：粗酶液总体积（mL），1mL；T：催化反应时间（min），10min。 注意：若反应较弱， （A 测定管－A 对照管）差值较小，可适当延长反应时间（20-30min），即 第一步水浴时间，*计算酶活时对公式进行修改。

相关文献：

《Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation》 作者:XIN-BIN GUO,XIN DENG,YING WEI 期刊:Wiley Online Library 影响因子: PMID:29139175
《MicroRNA?93?5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression》 作者:Shi?Jun Wang, Yun?Fei Cao, Zu?Qing Yang, Zhi?Yuan Jiang, Bin Cai, Jiao Guo, Sen Zhang, Xiao?Long Zhang, Feng Gao 期刊:Oncology Letters 影响因子:0.237 PMID:

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