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产地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
货号 | BC1375 |
保存条件 | 2-8℃保存 |
英文名称 | Total sputum test box |
CAS编号 | |
保质期 | 1年 |
产品规格:100管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:190
库存状态:现货
关键字:巯基含量检测|总巯基含量检测|总巯基试剂盒|微量法
简要介绍:
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质, 而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。巯基基团与 5,5’- 二硫代-双-硝基ben甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有 *吸收峰。
产品详细描述
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 |
BC1375-100管/48样 | Solarbio | 100管/48样 | 190.00元 | ![]() |
试剂组成和配制
提取液:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 20 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 1 mL×1 支,4℃避光保存。
标准品:粉剂×1 支,10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)。临用前加入 1.3mL 蒸馏水,浓度为 25μmol/mL, 取一部分稀释成 0.5μmol/mL 待测,其余 4℃保存
产品说明:
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而 且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量,能 够间接测定蛋白质巯基含量。 巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基ben甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有*吸 收峰。
自备实验用品: 天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品的制备:
(1) 动物、植物组织:称取约 0.1g,加入 1mL 的提取液,制备成 10%的匀浆,8000g,常温离心 10min,取上清待测。
(2) 血清,培养液:直接测定。
二、测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 412nm,蒸馏水调零。
2、 操作表
对照管 | 测定管 | 标准管 | 空白管 | |
样品(μL) | 40 | 40 | ||
标准品(mL) | 40 | 40 | ||
试剂一(μL) | 150 | 150 | 150 | 150 |
试剂二(μL) | 10 | 10 | ||
H2O(μL) | 10 | 10 | ||
混匀,25℃静置 10min, 1cm 光径玻璃比色皿,双蒸水调零,测定 412nm 吸光值,ΔA=A 测定-A 对照。 |
计算公式
总巯基标准曲线:y = 1.7236 x,R 2 = 0.9994
1. 组织:
(1)按样本质量计算
总巯基含量(μmol/g)= 1.7236 DA ×V 反总÷ (V 样÷V 样总×W)=2.9×ΔA÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
总巯基含量(μmol/mg prot)= 1.7236 DA ×V 反总÷(V 样×Cpr)=2.9×ΔA÷Cpr
2. 血清、培养液:
总巯基含量(μmol/L)= 1.7236 DA ×V 反总÷V 样×103 =2900×ΔA V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL;V 样总:加入提取液体积, 1mL; W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;103 :1mmol/ L=103 μmol/ L
注意事项 *检出限为 10μ mol/L
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