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产地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
货号 | BC0950 |
保存条件 | 2-8℃保存 |
英文名称 | Succinate dehydrogenase (SDH) detection kit |
CAS编号 | |
保质期 | 1年 |
产品规格:50管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:470
库存状态:现货
关键字:: 琥珀酸脱氢酶检测试剂盒|SDH检测试剂盒|琥珀酸脱氢酶|试剂盒
简要介绍:
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH 是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
SDH 催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯fen靛酚(DCPIP),并且在600nm 处具有特征吸收峰,通过600nm 吸光度的变化,测定2.6-DPIP 的还原速度,代表SDH 酶活性。
产品详细描述
产品内容:
试剂一:液体60mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体0.6mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入到试剂三中溶解待用;
试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入4mL双蒸水,用不完的试剂仍4℃保存;
试剂六:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入3.333mL双蒸水,用不完的试剂4℃保存。
产品说明:
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶 ,位于线粒体内膜 上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链 提供电子。
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯fen靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。
试验所需自备仪器和样品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、SDH的提取
准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂二,用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨,4 ℃ 11000 g离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤和加样表
分光光度计预热30min以上,调节波长至600nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
试剂名称(μL) | 测定管 | 空白管 |
试剂三 | 60 | 60 |
试剂五 | 60 | 60 |
蒸馏水 | 800 | 800 |
37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)保温10min左右 | ||
样本 | 30 | |
蒸馏水 | 30 | |
试剂六 | 30 | 30 |
依次加各试剂到1 mL比色皿中,在加入试剂六的同时开始计时;在600 nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1,比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中,准确反应1分钟;迅速取出比色皿并擦干,600 nm下比色,记录1分20秒时的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2,得到ΔA测定,ΔA空白。