产品名称:：  脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒

产品英文名： Dehydroascorbic Acid （DHA）Assay Kit

产品货号：BC1240               产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：50管/48样                    产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：540
库存状态：现货                          
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简要介绍：
AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
DTT还原DHA生成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
 
产品详细描述
产品内容：
试剂一：液体50 mL×1瓶，室温保存。
试剂二：液体40 mL×1瓶，室温保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入10mL蒸馏水充分溶解。
标准品：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加入5.743 mL蒸馏水充分溶解；吸取0.1 mL上述溶液，加入0.9 mL蒸馏水，混匀，即为100μmol/L DHA。
产品说明：
AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
DTT还原DHA生成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品：
低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品中DHA提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；12000g，4℃离心10min，取上清液置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
二、DHA测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到265 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。
3. 标准管：依次在1mL石英比色皿加入100μL标准液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值A1和A2，△A空白管=A2-A1。
4. 测定管：依次在1mL石英比色皿加入100μL上清液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值A3和A4，△A测定管=A4-A3。
注意：标准管只需测定一次。