产品名称:：  脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒 微量法

产品英文名：Micro Dehydroascorbic Acid （DHA）Assay Kit

产品货号：BC1245               产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：100管/96样                 产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：1440
库存状态：现货                          
关键字：：   脱氢抗坏血酸检测试剂盒|DHA检测试剂盒| 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测|试剂盒

简要介绍：
AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
DTT还原DHA生成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
 
产品详细描述
产品内容：
提取液：液体110 mL×1瓶，室温保存。
试剂一：液体20 mL×1瓶，室温保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加入5mL蒸馏水充分溶解。
标准品：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加入5.743 mL蒸馏水充分溶解；吸取0.1 mL上述溶液，加入0.9 mL蒸馏水，混匀，即为0.1μmol/mL DHA。
产品说明：
AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA 的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
DTT还原DHA生成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品：
 低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品中DHA提取：
    称取约0.1g样品，加提取液1 mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。
二、DHA测定操作：
1. 紫外分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到265 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂一在25℃水浴锅中预热30 min以上。
3. 标准管：依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL标准液、160μL预热的试剂一和20μL试剂二，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值，分别为A1，A2，△A标准管=A2-A1。
4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL预热的试剂一和20μL试剂二，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值，分别为A3，A4，△A测定管=A4-A3。
三、DHA含量计算公式：
（1）按蛋白浓度计算
DHA(μmol/mg prot) =C标准液×(△A测定管÷△A标准管)÷Cpr
                 =0.1×△A测定管÷△A标准管÷Cpr
（2）按样本鲜重计算

DHA(μmol/g 鲜重) = [C标准液×(△A测定管÷△A标准管)×V样总]÷W
                 =0.1×△A测定管÷△A标准管÷W
    C标准液：DHA浓度，0.1μmol/mL；V样总：上清液总体积，1.0mL；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。

注意事项：

1. 临用前配制的试剂未使用完的4℃保存，3天内使用完。

2. *检出限为10μmol/L。