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| 产地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | BC2350 |
| 保存条件 | 2-8℃保存 |
| 英文名称 | Acyltransferase (AAT) activity assay kit |
| CAS编号 | |
| 保质期 | 1年 |
产品规格：25管/24样 产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存； 参考价格：2400
库存状态：现货
关键字: ： 酰基转移酶检测试剂盒|AAT检测试剂盒| 酰基转移酶|试剂盒
简要介绍：
AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412 nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。
产品详细描述
产品内容：
提取液：液体10 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存。临用前加蒸馏水0.6 mL充分溶解，4℃保存。
试剂三：液体1 mL×1支，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入试剂一0.6 mL充分溶解，4℃避光保存；
产品说明：
AAT是一个多功能蛋白大家族，主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应，在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412 nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
操作步骤：
样本的前处理：
称取约0.1g样品，加提取液1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。
测定步骤：
分光光度计预热30min 以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。
试剂一在37℃水浴保温30 min以上。
样本测定
| 试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 |
| 蒸馏水 | 100 | - |
| 上清液 | - | 100 |
| 试剂一（预热） | 700 | 700 |
| 试剂二 | 50 | 50 |
| 试剂三 | 100 | 100 |
| 试剂四 | 50 | 50 |
将上述试剂按顺序加入1 mL 玻璃比色皿中，加试剂四的同时开始计时，在412nm 波长下记录10s时的初始吸光度A1 和130s后的吸光值A2，计算ΔA空= A2空-A1空；ΔA测= A2测-A1测，ΔA=ΔA测-ΔA空。
注：如果△A测偏低，可以延长反应时间，如测定10 s和310 s的吸光度，相应修改计算公式中反应时间。
三、AAT活性计算：
按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。。
AAT (U/mg prot) = 1000×ΔA÷(Cpr×V样) ÷T= 5000×ΔA÷Cpr；
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
按样本鲜重计算：
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每克组织每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U/g 鲜重) = 1000×ΔA÷(V样÷V样总×W) ÷T=5000×ΔA÷W
按血清浓度计算：
单位的定义：37℃中每mL反应体系下每mL血清每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U/mL 血清) = 1000×ΔA÷V血清÷T= 5000×ΔA。
Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL；V样：加入反应体系中上清液体积，0.1mL；W ：样品质量；V样总：提取液体积，1 mL；T：反应时间，2min；V血清：0.1mL。
注意事项：
上清液蛋白质含量需要另外测定。建议购买本公司生产的BCA蛋白质含量测定试剂盒。
当吸光值大于1时，建议稀释后测量。
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