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| 产地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | BC2145 |
| 用途 | |
| 英文名称 | Tissue and blood alkaline phosphatase (AKP/ALP) activity assay kit |
| 包装规格 | |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 保质期 | 1年 |
| 是否进口 |
产品详细描述
产品内容：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体15mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。
标准品：液体1mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。
产品说明：
AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以*为主。
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁qing化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。
操作步骤：
粗酶液提取：
称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm离心10min，取上清液待测。血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。
测定操作：
1.分光光度计预热30 min以上，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂一置于37℃水浴中预热30 min以上。
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 | 空白管 | 标准管 |
| 蒸馏水 | - | - | 4 | - |
| 2μmol/mL标准品 | - | - | - | 4 |
| 上清液 | 4 | - | - | - |
| 试剂一 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 试剂二 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 混匀后置于37℃水浴中保温15min | ||||
| 试剂三 | 120 | 120 | 120 | 120 |
| 上清液 | - | 4 | - | - |
| 混匀后于510 nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。 | ||||
三、AKP/ALP活性计算：
1.按蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。
AKP/ALP (U/mg prot)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T
=0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr
2.按样本鲜重计算
活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。
ACP活力(U/g鲜重)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷(W÷V提取×V样)÷T=0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷W
3.血液中ACP活性计算
活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
ACP活力(U/mL)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T
=0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
C标准品：2μmol/mL；V反总：反应体系总体积（mL），1020μL=1.02mL； V样：加入反应体系中上清液体积（mL），0.02mL；T：反应时间（min），15 min；V提取：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
相关文献：
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