碱性木聚糖酶（BAX）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3610
规格：50T/24S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：460.00
库存状态：现货
关键词：碱性木聚糖酶|碱性木聚糖酶活性检测|BAX|BAX活性检测
产品内容：
缓冲液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1 支，4℃保存。10mg 木糖。临用前加入 667μL 蒸馏水配制成 100μmol/mL 的木糖标
准溶液。再稀释 50 倍即 2μmol/mL 的木糖标准溶液备用。
产品说明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，
可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释
放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业
中，碱性木聚糖酶（BAX）一般分离自最适生长 pH 为 9-11 的微生物。
BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基
水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，
通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 BAX 活力。
需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取
1. 发酵液：发酵液于 8000rpm，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约 1mg，加 1mL 缓冲液溶解，蒸馏水稀释 10 倍待测。
3. 组织样品：称约 0.1g 组织，加入 1mL 缓冲液，冰上充分研磨。8000rpm，4℃，离心 15min，取
上清蒸馏水稀释 10 倍待测。
二、测定步骤
1、可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在 EP 管中加入下列试剂）
试剂名称（μL） 对照管 测定管 空白管 标准管
样品 200 200 - -
2μmoL/mL 木糖标准品 - - - 200
蒸馏水 - - 200 -
缓冲液 300 300 300 300
试剂一 - 200 200 200
混匀，50℃水浴中反应 30min，立即沸水浴中 10min 灭活。(注意不要让盖子爆开，以免进
水，改变了反应体系)
试剂一 200 - - -
试剂二 300 300 300 300
混匀，沸水浴中显色 5min(注意不要让盖子爆开，以免进水改变了反应体系)，冷却后尽快
测定各管 540nm 下的吸光度，分别记为 A 测定、A 对照、A 标准、A 空白。
三、BAX 活性计算：
1. 发酵液 BAX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH 9.0 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶
量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力（U/mL）=C 标准×（A 测定-A 对照）÷（A 标准-A 空白）÷T
=0.067×（A 测定-A 对照）÷（A 标准-A 空白）
C 标准：木糖标准溶液浓度，2μmoL/mL；T：反应时间，30min。

第 2 页，共 2 页