产品名称: 山梨醇脱氢酶活性检测试剂盒

产品英文名: Sorbitol Dehydrogenase (SDH) Assay Kit

产品货号：BC2530    产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格：50管/48样       产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            参考价格：940
库存状态：现货                          
关键字:    山梨醇脱氢酶检测试剂盒|山梨醇脱氢酶含量检测试剂盒|山梨醇脱氢酶|试剂盒

简要介绍：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山梨醇含量的关健酶之一。
SDH催化山梨醇脱氢生成果糖，同时还原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能将电子传递给NBT生成紫色的甲簪，根据这一原理可以计算SDH活性。

产品详细描述
产品内容：
提取液：液体125mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20℃保存；
试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；
混合液：将75mL提取液加入试剂一中，再从试剂一中分别吸取适量液体将试剂二和试剂三溶解后转移到试剂一中，混匀。可以每瓶15mL分装，-20℃保存。
试剂四：粉剂×5瓶，-20℃保存。临用前加入15mL混合液，即为工作液。现用现配，24h变质。
标准品：粉剂×1支，-20℃保存。临用前加入1.4mL蒸馏水，即10μmol/mL NADH标准品。
产品说明：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山梨醇含量的关健酶之一。
SDH催化山梨醇脱氢生成果糖，同时还原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能将电子传递给NBT生成紫色的甲簪，根据这一原理可以计算SDH活性。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：
1、可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2、标准管的测定：
   将10μmol/mL NADH标准品用水稀释至1.5、1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL的标准溶液，然后按下表操作：

3、样本的测定：

将上述试剂按顺序加1 mL玻璃比色皿中，加样本的同时开始计时，记录 10 秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴中准确反应3分钟；迅速取出比色皿并擦干，570nm下比色，记录3分10秒时的吸光度A2，计算        ΔA测定=A1-A2。 


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