产地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
货号 | BC2330 |
保存条件 | 2-8℃保存 |
英文名称 | Chymotrypsin activity assay kit |
保质期 | 1年 |
产品规格:50管/48样 产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存; 参考价格:780
库存状态:现货
关键字:: 糜蛋白酶检测试剂盒|糜蛋白酶检测|糜蛋白酶|试剂盒
简要介绍:
糜蛋白酶,又称胰凝乳蛋白酶,是*分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化,对脓性和非脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解,产物在237nm有特征光吸收;通过测定237nm光吸收增加速率,来计算糜蛋白酶活性。
产品详细描述
产品内容:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入50 mL 蒸馏水充分溶解。
产品说明:
糜蛋白酶,又称胰凝乳蛋白酶,是*分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化,对脓性和非脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解,产物在237nm有特征光吸收;通过测定237nm光吸收增加速率,来计算糜蛋白酶活性。
试验所需自备仪器和样品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、 1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清即粗酶液。
测定:
分光光计预热 30 min 以上,调节波长到 237 nm,蒸馏水调零。
试剂二置于37℃水浴中保温30min。
空白管:取1mL 石英比色皿,加入100μL 试剂一,1000μL 试剂二,充分混匀,于237nm 处测定4min内吸光值变化,记为△A空白管。(从吸光值稳定增加开始计时)
测定管:取1mL 石英比色皿,加入100μL 粗酶液,1000μL 试剂二充分混匀,于237nm 处测定4min内吸光值变化,记为△A测定管。(从吸光值稳定增加开始计时)
注意:空白管只需要测定一次。
三、糜蛋白酶活性计算:
按蛋白浓度计算
活性单位定义: 25度每毫克蛋白每分钟催化 吸光值增加1为一个酶活单位。
糜蛋白酶活(U/mg prot)= [ (△A 测定管-△A 空白管)×V 反总] ÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 测定管-△A 空白管)÷Cpr
V1:加入反应体系中粗酶液体积(mL),100μL=0.01 L; Cpr:粗酶液蛋白浓度( mg/mL),需要另外测定;V 反总:反应总体积,1100μL =1.1 mL; T:反应时间,4 min。
(2)按样本质量计算
活性单位定义:25度每毫克蛋白每分钟催化 吸光值增加1为一个酶活单位。
糜蛋白酶活(U/g)= [ (△A 测定管-△A 空白管)×V 反总] ÷(W×V1÷V 2)÷T
=2.75×(△A 测定管-△A 空白管)÷W
V1:加入反应体系中粗酶液体积(mL),100μL=0.01 L; V 反总:反应总体积,1100μL =1.1 mL;W,样本质量,g;T:反应时间,4 min。
注意事项:
临用前配置的试剂配置好后3天内使用完毕。