土壤淀粉酶（S-AL）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品商标：solarbio
英文名称：Soil amylase activity test kit
注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1920
规格：50T/24S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：580
库存状态：现货
关键词：土壤淀粉酶|土壤淀粉酶活性检测|土壤淀粉酶检测|淀粉酶
产品内容：
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解。
试剂三：液体65mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支。10mg 麦芽糖，4℃保存。临用前加入1.38mL蒸馏水配制成20μmol/mL的储备液。

产品说明：
淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物，是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
淀粉酶水解淀粉产生还原糖，可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在540nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

需自备的仪器和用品：
天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、甲苯。

操作步骤:
一、样品处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50 目筛。
二、测定步骤：
1. 分光光度计预热30min，波长调至540nm。蒸馏水调零。
2. 将20μmol/mL 的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL 的标准溶液备用。
3. 测定步骤：
试剂名称           测定管          对照管         标准管          空白管
土样(g)              0.1              0.1              -             -
甲苯（μL）          20               20              -             -
蒸馏水（μL）         -               200             -             -
试剂一（μL）        200              200             -              -
试剂二（μL）        200               -              -               -
充分震荡混匀，37℃水浴或37℃恒温箱培养24h，之后12000rpm，常温离心10min，取上清。
上清液（μL）        300              300              -              -
蒸馏水（μL）         -                -                -             300
标准溶液（μL）       -                -               300             -
试剂三（μL）        700              700              700            700
充分混匀，沸水浴10min，至冰上冷却，于1mL 玻璃比色皿中测定540nm 处的吸光值，分别记为A 对照管、A 测定管、A 标准管和A 空白管，计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。A 空白管只需测1-2 次。

三、土壤淀粉酶活力的计算:
（1）标准曲线的绘制：
以标准溶液的浓度为x 轴，ΔA 标准为y 轴绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b。将ΔA 测定带入方程得到x（μmol/mL）
（2）酶活的计算：
单位的定义：每天每g 土样产生1μmol 还原糖定义为一个土壤淀粉酶活力。
S-AL（U/g 土样）=x×V 反总÷W÷T=0.42×x÷W。

V 反总：酶促反应总体积，0.42mL；
W：土样质量，g；
T：反应时间，1d。

注意事项：
1. 当ΔA 大于1 时，建议将上清液稀释后再进行测定，注意在计算公式中乘以稀释倍数。
2. 若ΔA 测定较小，增加反应的上清液体积或适当增加酶促反应时间，计算酶活时对公式进行修改。
3. 吸光值请于30min 内测定完成。