土壤碱性蛋白酶（Solid - Alcalase Protease，S-ALPT）试剂盒说明书
分光光度法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil alkaline protease activity detection kit
产品商标：solarbio
货号：BC0880
规格：50 管/24 样
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：780
库存状态：现货
关键词：土壤碱性蛋白酶活性检测|土壤碱性蛋白酶|碱性蛋白酶|
产品内容：
试剂一：液体60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入10mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入100uL 试剂七使粉剂润湿，然后加入20mL 试剂一，转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入50mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂五：液体10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体1.5mL×1 支，0.05mg/mL 标准酪氨酸溶液；
试剂七：液体1.5mL×1 支，4℃保存；

产品说明：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。碱性条件下，S-ALPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm 有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水

操作步驟：
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、试剂二、三和四40℃水浴10min。
3、样本测定：

试剂名称                测定管                  对照管
风干土样（g）          0.02                      0.02
试剂一（μL）            100                      300
试剂三（μL）            200
混匀后，40℃水浴30min，振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触
试剂二（μL）            100                       100
                 混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液
                       测定管                   对照管                 标准管
上清液（μL）             150                       150
试剂六（μL）                                                             150
试剂四（μL）              700                      700                     700
试剂五（μL）              150                      150                     150
                 混匀，40℃水浴20min，680nm 下读取各管吸光值A

注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

S-ALPT 活性计算：
单位定义：每天每g 土样中产生1mg 酪氨酸为一个S-ALPT 活力单位。
S-ALPT(U/g)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=48×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；
V 反总：反应体系总体积，0.4mL；
T：反应时间，30min=1/48d；
W：样本质量，0.02g。

相关文献：

《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影响因子:2.914 PMID:29860689