土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil α-glucosidase (S-α-GC) activity detection kit
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3085
规格：100 T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1200
库存状态：现货
关键词：土壤α-葡萄糖苷酶|α-葡萄糖苷酶|S-α - GC|S-α - GC检测
产品内容：
试剂一：甲苯0.5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入5mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体15mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体30mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，5 mmol/L的对硝基ben酚溶液。临用前用试剂三将标准品稀释50倍得100μmol/L 的标准溶液。

产品说明：
S-α-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-α-GC 能够催化对-硝基ben-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在400nm 有特征光吸收。

自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、50目筛（或更小）、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作操作：
一、样本处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

二、测定操作：
（1）分光光度计/酶标仪预热30min，蒸馏水调零。
（2）加样表：
试剂名称      测定管     对照管     标准管     空白管
风干土样（g）  0.02        0.02        -          -
试剂一（μL）    5           5         -          -
振荡混匀，使土样润湿，室温放置15min
试剂二（μL）    80          -         -           -
试剂三（μL）   100         100        -           -
混匀， 37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水/冰浴冷却。
试剂二（μL）     -          80          -           -
10000rpm 25℃离心10min，取上清液
上清液（μL）     100       100          -            -
标准品（μL）      -         -          100            -
蒸馏水（μL）      -         -                        100
试剂四（μL）      200      200         200           200
充分混匀，室温静置2min 后，测定吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A 测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-α-GC 活力计算：
单位的定义：每天每g土样中产生1 μmol 对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力（U/g 土样）＝ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =0.444× ΔA÷ ΔA标准÷W。

T：反应时间，1h=1/24d；
V 反总：反应体系总体积：1.85×10-4 L；
C标准：标准溶液浓度，100μmol/L
W：样本质量。

注意：若ΔA<0.01，可延长37℃水浴时间；若ΔA>1.5，可将上清液稀释后进行测定；*计算时注意各个因素的改变。