土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil glutaminase (S-GLS) activity assay kit
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3975
规格：100T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1160
库存状态：现货 
关键词：土壤谷氨酰胺酶|土壤谷氨酰胺酶活性检测|S-GLS|S-GLS活性检测
产品内容：
试剂一：液体15mL×1 瓶，4 ℃保存；
试剂二：液体40 mL×1 瓶，4 ℃保存；
试剂三：液体60mL×1 瓶，常温保存；
试剂四：液体5 mL×1 瓶，常温保存；
试剂五：液体3 mL×1 瓶，常温保存；
试剂六：液体3 mL×1 瓶，常温避光保存；

产品说明：
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS 催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

试验需自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。

测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。
2、样品测定（在EP 管中加入下列试剂）：
试剂名称（uL）         测定管            对照管
样本                     0.1
甲苯                     25                25
                            振荡混匀，室温放置15min
试剂一                  100               100
试剂二                  400               400
                    混匀，37℃水浴2 小时
试剂三                  525               525
     混匀，8000 g，25℃离心10 min；取上清液，依次加入下列试剂
上清液                  130                130
试剂四                   30                30
试剂五                   20                20
试剂六                   20                20
        混匀，室温静置15min，420nm 处读取测定管和对照管吸光值，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管

注意：试剂六如出现沉淀，静置后取上清使用。

四、酶活性计算
计算公式：
a) 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y=0.0084x-0.005；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值A。
单位定义：每g 土样每min 催化谷氨酰胺生成1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS（μmol/min/g 土样）＝(ΔA+0.005)÷0.0084×V 反总÷W÷T=0.521×(ΔA +0.005)÷W。

V 反总：反应体系总体积，0.525mL；
T：反应时间，2h=120min；
W：样本质量，g。

b) 用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0042x -0.005；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值A。
单位定义：每g 土样每min 催化谷氨酰胺生成1μmol 氨定义为一个酶活力单位。

S-GLS（μmol/min/g 土样）＝(ΔA+0.005)÷0.0042×V 反总÷W÷T=1.042×(ΔA +0.005)÷W。
V 反总：反应体系总体积：0.525mL；
T：反应时间，2h=120min；
W：样本质量，g。