土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil aryl sulfatase activity assay kit
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC3995
规格：100T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1440
库存状态：现货
关键词：土壤芳基硫酸酯酶|土壤芳基硫酸酯酶活性检测|土壤芳基硫酸酯酶检测
产品内容：
试剂一：甲苯2mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体12mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入5mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂四：液体30mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，5 mmol/L的对硝基ben酚溶液。临用前用试剂二将标准品稀释50倍得100μmol/L 的标准溶液。

产品说明：
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
S-ASF能够催化对-硝基ben硫酸钾生成对-硝基ben酚，后者在410nm有特征光吸收。

自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50目筛（或更小）、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：
一、样本处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

二、测定步骤：
（1）分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至410nm，蒸馏水调零。

（2）加样表：
试剂名称       测定管     对照管      标准管      空白管
风干土样（g）   0.02        0.02         -           -
试剂一（μL）    10          10          -           -
振荡混匀，使土样全部潮湿，室温放置15min
试剂二（μL）    100         100         -            -
试剂三（μL）     80          -           -            -
混匀， 37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（盖紧， 防止水分散失），流水/冰浴冷却。
试剂三（μL）      -          80          -            -
10000rpm 25℃离心10min，取上清液
上清液（μL）     100         100         -             -
标准品（μL）      -           -         100            -
蒸馏水（μL）      -           -          -            100
试剂四（μL）     200         200        200           200
充分混匀，室温静置2min 后，吸取200μL于比色皿/96孔板中测定吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A 测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-ASF 活力计算：
单位的定义：每天每g土样中产生1 μmol 对-硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力（U/g 土样）＝ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =0.456× ΔA÷ ΔA标准÷W。

T：反应时间，1h=1/24d；
V 反总：反应体系总体积：1.9×10-4 L；
C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；
W：样本质量。