土壤FDA 水解酶活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品商标：solarbio
英文名称：Soil FDA hydrolase activity test kit
注意：正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
货号：BC0485
规格：100T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1200
库存状态：现货
关键词：土壤FDA水解酶|土壤FDA水解酶活性检测|土壤FDA水解酶检测|FDA|FDA水解酶
产品内容：
试剂一：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存，临用前加2mL 丙tong溶解。
标准品：粉剂×1 瓶，10mg 荧光素，-20℃避光保存。临用前加入3.03mL 50%丙tong（丙tong（V）：
蒸馏水（V）=1:1）配成10μmol/mL 的荧光素标准溶液，可45℃水浴促进溶解。

产品说明：
FDA 水解反应能很好的反应土壤中微生物活性和土壤质量的变化以及生态系统中有机质的转化，是土壤质量研究中的重要生物学指标之一。
FDA 是一种无色化合物，在介质中能被许多土壤酶所催化水解，并经脱水反应，产生酶解终产物荧光素，稳定不易被分解，并在490nm 处有强吸收峰，通过检测490nm 处的吸光值变化可计算得FDA 水解酶活性。

需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、恒温水浴锅、丙tong、30 目筛或更小。

操作步骤：
一、样本处理
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30 目筛。
二、测定操作表
1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至490nm，50%丙tong调零。
2. 将10μmol/mL 的荧光素标准溶液用50%丙tong稀释为2、0μmol/mL 的标准溶液（0 为空白管）。分别吸取200μL 于比色皿/96 孔板中测定490nm 下的吸光度A 标准，A 空白，计算ΔA 标准=A 标准-A 空白。
对照管         测定管
样本（g）                0.03            0.03
试剂一（μL）             150             150
丙tong（μL）               135              -
试剂二                    15              15
充分混匀，37℃，震荡1h
丙tong（μL）                 -               135
10000g，25℃，离心5min，取200μL 上清测定490nm 处吸光值A，分别记为A 测定管、A 对照管。计算△A=A 测定管-A 对照管注意：空白管和标准管只需测定一到两次。

三、FDA 水解酶活性计算公式
酶活性定义：每克土壤每天产生1μmol 荧光素的量为一个酶活力单位。
FDA 活性（U/g 土样）=（△A÷ΔA 标准×C 标准品）×V 反总÷W ÷T=14.4×（△A÷ΔA 标准）÷W

C 标准品：标准品浓度2μmol/mL；
V 反总：反应总体积，0.3 mL；
W：样本质量，g ；
T：反应时间，1h =1/24d。

注意事项：
1. 尽量采用新鲜土样或者短期低温保存样品，否则很难准确反映酶的活性。
2. 测定之前进行预实验，若吸光值大于1.2，请进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。 若吸光值过小，可增加土样质量或增加反应时间来进行测定。