土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4005
规格：100T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1440
库存状态：现货
关键词：土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶|S-NAG|S-NAG活性检测
产品内容：
试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2mL丙tong溶解，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体30mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，5 mmol/L的对硝基ben酚溶液，4℃保存。临用前用试剂一将标准品稀释50倍得100μmol/L 的标准溶液。

产品说明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在400nm有*吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50目筛（或更小）和蒸馏水。

操作步骤：
一、样本处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
二、测定步骤：
（1）分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至400nm，蒸馏水调零。
（2）加样表：
试剂名称          测定管       对照管        标准管         空白管
风干土样（g）      0.03          0.03           -              -
试剂一（μL）       165           165           -              -
试剂二（μL）        15            -            -               -
混匀，37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水/冰浴冷却。
试剂二（μL）         -            15           -               -
12000g 25℃离心10min，取上清液
上清液（μL）        100           100          -               -
标准品（μL）         -             -          100              -
蒸馏水（μL）        -              -           -               100
试剂三（μL）       200            200         200             200
室温静置2min 后，10000g 常温离心5min，吸取200μL上清于微量玻璃比色皿或直接在96孔板中，测定400nm处的吸光值A。分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A 测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-NAG 活力计算：
单位的定义：每天每g土样中产生1 μmol 对硝基ben酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG活力（U/g 土样）＝ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =0.432× ΔA÷ ΔA标准÷W。

T：反应时间，1h=1/24d；
V 反总：反应体系总体积：1.8×10-4 L；
C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；
W：样本质量。

注意事项：
1、当ΔA 大于1 时，建议将上清液稀释后进行测定；当ΔA 小于0.02 时，建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。