土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书
微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Soil leucine aminopeptidase (L-LAP) activity assay kit
产品商标：solarbio
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4025
规格：100T/48S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：1600
库存状态：现货
关键词：土壤亮氨酸氨基肽酶|土壤亮氨酸氨基肽酶活

产品内容：
试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入3mL丙tong溶解。

产品说明：
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基ben胺生成对硝基ben胺，后者在405nm有*吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

自备实验用品及仪器：
天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙tong、30目筛（或更小）。

操作步骤：

一、样本处理
土样自然风干，过30-50目筛。

二、测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。
2、加样表：
测定管      对照管
上样（g）      0.03         0.03
甲苯（μL）      15          15
震荡混匀，室温静置15min。
试剂一（μL）    255         255
试剂二（μL）     30          -
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。流水冷却至室温。
试剂二（μL）      -          30
14000g 常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照顾管。

三、酶活计算公式
（1） 按微量比色皿计算：酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol 对硝基ben胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性（U/g）=△A/(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.507×△ A÷W 。

ε：对硝基ben胺摩尔消光系数：9.87×103 L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；
V 反总：反应总体积，1mL=3×10-4 L；
W：土样质量，g；
T：反应时间，60min；
109：1mol=109nmol。
（2） 按96孔板计算：
酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol 对硝基ben胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性（U/g）=△A/(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.844×△ A÷W 。

ε：对硝基ben胺摩尔消光系数：9.87×103 L/mol/cm；
d：96 孔板光径，0.6cm；
V 反总：反应总体积，1mL=3×10-4 L；
W：土样质量，g；
T：反应时间，60min；
109：1mol=109nmol。