尿素氮（BUN）检测试剂盒说明书 微量法

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
英文名称：Urea nitrogen content test kit
产品商标：solarbio
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1535
规格：100T/96S
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；            
参考价格：220
库存状态：现货
关键词：尿素氮|尿素氮检测|尿素氮测定|BUN|BUN检测
产品内容：
标准品：液体1mL×1 支，4℃保存。
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加4mL 蒸馏水充分溶解。
试剂二：液体8mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

产品说明：
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。在碱性条件下，尿酶水解尿素产生氨，氨与次氯酸反应生成氯胺，再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚，在630nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。

操作步骤：
一、样品处理
1. 组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5-10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），匀浆后于25℃，10000rpm 离心10min，取上清待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1 的比例（建议500万个细胞加入1mL 蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3 s，间隔7 s，总时间3min）；然后4℃，10000g 离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体：直接检测。
二、测定操作
空白管      标准管       测定管
样品（μL）              -           -            20
标准品（μL）            -           20            -
H2O（μL）             20           -             -
试剂一（μL）           40           40            40
充分混匀，于 37℃反应 10min
试剂二（μL）           70           70            70
试剂三（μL）           70           70            70
充分混匀，于 37℃显色 10min，于微量石英比色皿/96 孔板，双蒸水调零，测定630nm 处吸光值，记为 A 空白管、A 标准管和 A 测定管。

三、计算公式：
1. 按样本质量计算：
尿素氮含量（mg/g）= （A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）×C 标准品÷W= 0.005×（A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）÷W
2. 按细胞数计算：
尿素氮含量（mg/104cell）= （A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）×C 标准品÷细胞数量= 0.005×（A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）÷细胞数量
3. 按液体体积计算：
尿素氮含量（mg/L）=（A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）×C 标准品=5×（A测定管- A空白管）/（A标准管- A空白管）

C 标准品：标准品浓度，5mg/L；
W：样品质量，g

注意事项：
1、配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
2、*检测限为80μg/L