货号：T2210 

规格：50T/200T（25μl 体系为例） 

试剂组成： 

25×One Step RT-qPCR RTase mix 

5×One Step RT-qPCR Buffer 

10×Enhancer 

保存：

-20℃保存长期保存，使用前应混匀，避免反复冻融。 

产品说明： 

TaqMan One Step RT-qPCR kit （qRT-PCR Probe）是一步法（One Step）RT-PCR 荧光定量探针 法定性、定量反应的专用试剂，反应过程在同一管内连续进行，避免开管，能有效防止污染。本品 含有高温反转录酶（RNase H-）和新型热启动酶，具有更高的反转录和 PCR 扩增效率，适合于低 浓 度 RNA 模板的高灵敏度扩增。本试剂采用优化配方的专用 Buffer，可以在较宽的定量区域内 得到良 好的标准曲线，准确进行定量，并与多数厂家的荧光定量 PCR 仪兼容，如 Applied Biosystems、 Eppendorf、Bio-Rad 和 Roche 等。 

试剂原理： 

TaqMan One Step RT-qPCR kit首先利用反转录酶RTase将RNA反转录成cDNA，再以cDNA为模板 通过热启动DNA扩增酶在单管闭管反应体系中连续进行PCR扩增反应，利用荧光标记探针（Probe） 水解发光，并对发光信号进行检测。 

1. RT-PCR 首先采用反转录酶以RNA为模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的 热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段。 

2. 荧光检出 TaqMan 探针法是使用 5’端带有荧光物质，3’端带有淬灭物质的 TaqMan 探针进行荧光检测的方法。 在探针没有被 Taq 酶分解时，5’端的荧光物质受到 3’端淬灭物质的制约，不能发出荧光。而当 TaqMan 探针被分解后，5’端的荧光物质便会游离出来，发出荧光。在 PCR 反应液中加入荧光探针后的退火 过程中，荧光探针便会和模板配对区域结合。在 PCR 反应的延伸过程中，Taq DNA 聚合酶的 5’→3’ 核酸外切酶活性可以分解和模板杂交的荧光探针，游离出的荧光物质便会发出荧光。通过检测反应 体系中的荧光强度，可以达到检测 PCR 产物扩增量的目的。