产品简介：  

1.            中文名： 小牛胸腺   DNA  

2.            英文名： Calf Thymus DNA  

3.            CAS＃： 73049-39-5  

4.            别 名：DNA sodium salt from calf thymus Thymonucleic acid sodium salt

5.            外 观：白色纤维状

6.            特 性：型号：Type I

7.            溶解性：溶于水，参考浓度1mg/ml，4℃条件下轻轻摇晃过夜为佳方法，但不可剧烈              震荡。

8.            S：22-24/25

9.            储存条件：2-8℃

10.        产 地：

11.        说 明：用于DNA相关研究。

制备方法：  

1. 取新鲜（或冰冻）的小牛胸腺，除去血水和结缔组织，在冰浴上切成小块，称取  20g，加入2倍体积的0.1mol/L氯化钠-0.05mol /L，pH=7.0柠檬酸钠缓冲溶液，于组织捣碎机上高速匀浆5分钟。   

2. 组织糜用转速为  3000r/min的      离心机    离心15分钟，将沉淀用50 mL上述缓冲溶液洗涤2次，洗涤时用匀浆器研磨洗涤，每次如前离心。向后得到的细胞核沉淀中加入6倍体积的10%氯化钠溶液，充分搅匀置冰箱中过夜，以充分提取DNP，溶液为粘稠状。将所得的半透明粘稠状液体，用滴管慢慢注入冷      蒸馏    水中，边加边轻轻搅动（NaCl的终浓度为0.14mol/L），这时有白色丝状物——核蛋白析出，在冰箱中静置数小时，收集沉淀。将沉淀物再溶于4倍体积的10%氯化钠溶液中，迅速搅拌以加速溶解。加入1/2体积的氯仿- 异戊醇混合液，剧烈振荡5分钟左右，用转速为3000r/min的离心机离心15分钟，得三层：上层为含有DNA和DNA核蛋白的水层，下层为氯仿-异戊醇的有机溶剂层，变性蛋白质介于两层之间。   

6. 吸出上面的水层，再用氯仿  -异戊醇如前进行脱蛋白，直至界面处不再出现变性蛋白质为止。   

7. 后吸出上清液并将其注入两倍体积的  95%乙醇中，用玻璃棒搅起白色纤维状DNA沉淀，沥干，用80%乙醇洗涤，后用少量无水乙醇洗涤。尽量沥干乙醇后，铺开在表面皿上。置于真空干燥器内干燥，即得白色纤维DNA钠盐。   

注意事项   ：  

（  1）由于DNA主要存在于细胞核中，为了便于提取DNA，应严格控制胸腺破碎的条件，既要将细胞膜破碎，又要尽可能避免细胞核被破坏，导致DNA释放而被断裂，。   

（  2）在用氯仿-异戊醇除去组织蛋白时，要剧烈振荡使蛋白变性。若振荡不够，蛋白质不能很好除去，则影响DNA制品的质量。