Bradford蛋白浓度测定试剂盒产品简介： 

考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用索莱宝生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明： 

微孔酶标仪法

1. 完全溶解蛋白标准品，取10ul，稀释至250ul ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在*溶液中，标准品也宜用*溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

  2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。 

  3. 将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。 

  4. 将样品作适当稀释（好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

  5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。

  6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。 

  7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

参考文献：

《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang，Qian Liu，Menghan Du，Yali Cui，Lixia Zhang，Lili Guo，Le Ma，Mingwei Chen， 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影响因子:3.046 PMID:

《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan，Li，Xiumei Li，Tianhui Liu，Shiheng Chen，Huihui Liu，Hui Wang，Kun Li，Yajian Song，Xuegang Luo，Junqi Zhao，Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:4.784 PMID:30986455