质粒大量提取试剂盒

 目录号                     包装                       价格
  D1110                      10T                      300.00

保存：常温保存，复检期一年。

试剂盒内容：

产品说明：

       本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物，一般从50-100ml大肠杆菌LB培养液中，可快速提取200-300μg高纯度高拷贝的质粒DNA，提取率达85-90%。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。

注意事项：

1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。

2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇。

3、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象 可在37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。

4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即盖紧盖子，如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机室温下进行离心。

5、如果是提取革兰氏阳性菌质粒，必须在裂解细胞前破细胞壁，方法如下：收集适量菌体，加入5ml溶液Ⅰ，充分悬浮菌体，加入溶菌酶至终浓度为10-20mg/ml，37℃处理30min左右。加入溶菌酶的浓度和处理时间可根据不同的菌株和具体试验条件进行调整。还可以选择D1120、D1130革兰氏阳性菌质粒提取试剂盒。

6. 洗脱缓冲液体积不应少于500ul，体积过小影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)， pH值低于7. 0会降低洗脱效率。 DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

7. 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用400-800ml过夜培养物，同时按照比例增加溶液Ⅰ 、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。

8. DNA浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 得到的DNA可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD₂₆₀处有显著吸收峰，OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、 40μg/ml单链DNA。OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响吸光值，但并不表示纯度低。

相关产品：

相关文献：

《A rapid and efficient one-step site-directed deletion, insertion, and substitution mutagenesis protocol》 作者:Deguang Wu，Xuewu Guo，Jun Lu，Xi Sun，Feng Li，Yefu Chen，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23256925
《Enhanced freeze tolerance of baker’s yeast by overexpressed trehalose-6-phosphate synthase gene (TPS1) and deleted trehalase genes in frozen dough》 作者:Haigang Tan,Jian Dong,Guanglu Wang,Haiyan Xu,Cuiying Zhang,Dongguang Xiao 期刊:Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 影响因子:2.533 PMID:24951963
《A two-step integration method for seamless gene deletion in baker’s yeast》 作者:Jian Dong，Guanglu Wang，Cuiying Zhang，Haigang Tan，Xi Sun，Mingyue Wu，Dongguang Xiao 期刊:Analytical Biochemistry 影响因子:2.275 PMID:23597844

公司简介：

     北京索莱宝科技有限公司 始创于 2000年， 是一家集 产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。公司总部位于北京，拥有1200平米研发生产中心，公司提供的产品近万种，超过5000种常备现货，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域，并不断推陈新出扩充种类，为用户提供优秀，专业的产品。  立足北京，辐射全国，随着产品营销战略的不断延伸，我们将逐步发展成为专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起，利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神，为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展，现公司正在诚招各地代理商，欢迎垂询并期待您的加入！

北京索莱宝科技有限公司，供应各种酶、辅酶、酶抑制剂相关产品以及其他生化试剂，实验、科研用品，参看如下产品类目，欢迎咨询！

产品类目：

1.细胞培养试剂,2.细胞培养耗材,3.蛋白质提取,4.蛋白质纯化,5.蛋白质定量,6.蛋白质电泳,7.蛋白质Marker,8.Western blot,9.免疫组化,10.抗体,11.SABC试剂盒,12.基因组和质粒提取试剂盒,13.核酸提取相关试剂,14.DNA电泳,15.DNA Marker,16.RNA相关试剂, 17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培养,21.碱基与核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白质,24.酶,25.辅酶,26.酶抑制剂,27.维生素,28.抗生素,29.染色剂,30.糖与碳水化合物,31.生物缓冲液,32.植物生长激素,33.酸和盐分离效,34.胺,35.层析介质,36.常用生化试剂,37.其他生化试剂,38.耗材,39.标准品,40.新增产品