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产地 | 中国 |
品牌 | Solarbio |
货号 | E1040 |
英文名称 | Endotoxin Erasol(for DNA solution) |
包装规格 | 20ml/100ml |
纯度 | 现询客服% |
CAS编号 | |
别名 | 内毒素清除剂 内毒素去除剂 |
分子式 | 现询客服 |
内毒素清除剂
产品简介:
本公司生产的内毒素清除剂主要用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的pH值、盐浓度和温度条件下,内毒素清除剂能与DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合,经过室温高速离心后,DNA或蛋白质等保留在水相,而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过3次以上重复抽提后可将活性为5000~50000 EU/ml的内毒素水平降低到5~0.5 EU/ml以下,即降低1000~10000倍。本试剂
操作步骤:
提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴5min,期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。
1、a)已纯化的质粒DNA内毒素清除:吸取500μl DNA溶液于微型离心管,加入1/10体积
b)在提取质粒DNA过程中清除内毒素:以碱裂解法提取质粒为例,在加入裂解液和中和液并离心去除碎片之后,吸取含质粒DNA的上清于新离心管中,冰浴5min。
2、加入1/5体积预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊。
3、冰浴5min,溶液应变清亮。
4、
5、12000rpm室温离心5min,溶液应分为两相,上层水相含DNA,下层油状相含内毒素。
6、将含DNA的上层水相转移到新管,弃油状相,重复抽提三次,即重复步骤2-6三次。
7、加入2.5体积无水乙醇,
8、用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性,并与初始样品比较。
注意事项:
1、DNA浓度>1mg/ml时清除内毒素效率降低。由于DNA和蛋白质本身的性质,清除程序可导致10-20%DNA丢失,所幸的是与清除内毒素的艰难相比DNA更容易提取制备。
2、所有溶液应用无内毒素的高纯水配制,所有器械材料均应不含内毒素,玻璃器皿可高温烘烤,非挥发性水溶液可高压
内毒素简介:
内毒素(endotoxin)原称热原,是革兰氏阴性菌细胞壁外膜及其它微生物细胞壁的主要组成成分,其化学本质为脂多糖,主要由O-特异性链、核心多糖和类脂A三部分组成。脂多糖共价连接到非极性的疏水性类脂A(Lipid A)形成带负电荷的大分子,同时还具有一个亲水性的寡糖核,因而具有疏水和亲水双重性质。制备质粒DNA和重组蛋白时,细菌破壁之后将释放大量脂多糖。无论是普通制备纯化程序,还是离子交换、凝胶排阻过滤,甚至是氯化铯超速离心等*制备程序,脂多糖任不可避免地与DNA或蛋白质牢固结合而被共同纯化。脂多糖具有强烈的免疫活性和细胞毒性,并能产生多种复杂的细胞生物学效应,大多数情况下会明显干扰并产生不可预测的实验结果。例如在DNA转染实验中,内毒素竞争性干扰转染试剂与DNA的结合,显著降低转染效率,并产生明显细胞毒性降低外源基因表达水平。
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公司简介:
北京索莱宝科技有限公司 始创于 2000年, 是一家集 产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。公司总部位于北京,拥有1200平米研发生产中心,公司提供的产品近万种,超过5000种常备现货,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域,并不断推陈新出扩充种类,为用户提供优秀,专业的产品。 立足北京,辐射全国,随着产品营销战略的不断延伸,我们将逐步发展成为专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起,利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神,为中国生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展,现公司正在诚招各地代理商,欢迎垂询并期待您的加入!
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产品类目:
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