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内毒素清除剂100ml
  • 英文名称:Endotoxin Erasol(for DNA solution)
  • 品牌:Solarbio
  • 产地:中国
  • 货号:E1040
  • 发布日期: 2019-05-31
  • 更新日期: 2025-04-30
产品详请
产地 中国
品牌 Solarbio
货号 E1040
英文名称 Endotoxin Erasol(for DNA solution)
包装规格 20ml/100ml
纯度 现询客服%
CAS编号
别名 内毒素清除剂 内毒素去除剂
分子式 现询客服

 

内毒素清除剂

 

产品简介:

本公司生产的内毒素清除剂主要用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的pH值、盐浓度和温度条件下,内毒素清除剂能与DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合,经过室温高速离心后,DNA或蛋白质等保留在水相,而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过3次以上重复抽提后可将活性为500050000 EU/ml的内毒素水平降低到50.5 EU/ml以下,即降低100010000倍。本试剂4℃可储存半年,-20℃长期储存。

 

操作步骤:

提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴5min,期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。

1a)已纯化的质粒DNA内毒素清除:吸取500μl DNA溶液于微型离心管,加入1/10体积3M NaAc pH5.21/20体积5M NaCl溶液,冰浴5min

   b)在提取质粒DNA过程中清除内毒素:以碱裂解法提取质粒为例,在加入裂解液和中和液并离心去除碎片之后,吸取含质粒DNA的上清于新离心管中,冰浴5min

2、加入1/5体积预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊。

3、冰浴5min,溶液应变清亮。

437℃水浴5min,不时振荡,溶液又变浑浊。

512000rpm室温离心5min,溶液应分为两相,上层水相含DNA,下层油状相含内毒素。

6、将含DNA的上层水相转移到新管,弃油状相,重复抽提三次,即重复步骤2-6三次。

7、加入2.5体积无水乙醇,-20℃沉淀30min或过夜;12000rpm离心10min,弃上清;加入70%乙醇洗涤沉淀,12000rpm离心5min弃上清;空气干燥沉淀,加入100200μl无内毒素的高纯水或TE溶解沉淀。

8、用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性,并与初始样品比较。

  

注意事项:

1DNA浓度>1mg/ml时清除内毒素效率降低。由于DNA和蛋白质本身的性质,清除程序可导致10-20DNA丢失,所幸的是与清除内毒素的艰难相比DNA更容易提取制备。

2、所有溶液应用无内毒素的高纯水配制,所有器械材料均应不含内毒素,玻璃器皿可高温烘烤,非挥发性水溶液可高压120℃高温处理。

 

内毒素简介:

内毒素(endotoxin)原称热原,是革兰氏阴性菌细胞壁外膜及其它微生物细胞壁的主要组成成分,其化学本质为脂多糖,主要由O-特异性链、核心多糖和类脂A三部分组成。脂多糖共价连接到非极性的疏水性类脂A(Lipid A)形成带负电荷的大分子,同时还具有一个亲水性的寡糖核,因而具有疏水和亲水双重性质。制备质粒DNA和重组蛋白时,细菌破壁之后将释放大量脂多糖。无论是普通制备纯化程序,还是离子交换、凝胶排阻过滤,甚至是氯化铯超速离心等*制备程序,脂多糖任不可避免地与DNA或蛋白质牢固结合而被共同纯化。脂多糖具有强烈的免疫活性和细胞毒性,并能产生多种复杂的细胞生物学效应,大多数情况下会明显干扰并产生不可预测的实验结果。例如在DNA转染实验中,内毒素竞争性干扰转染试剂与DNA的结合,显著降低转染效率,并产生明显细胞毒性降低外源基因表达水平。

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1.细胞培养试剂,2.细胞培养耗材,3.蛋白质提取,4.蛋白质纯化,5.蛋白质定量,6.蛋白质电泳,7.蛋白质Marker,8.Western blot,9.免疫组化,10.抗体,11.SABC试剂盒,12.基因组和质粒提取试剂盒,13.核酸提取相关试剂,14.DNA电泳,15.DNA Marker,16.RNA相关试剂, 17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培养,21.碱基与核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白质,24.,25.辅酶,26.酶抑制剂,27.维生素,28.抗生素,29.染色剂,30.糖与碳水化合物,31.生物缓冲液,32.植物生长激素,33.酸和盐分离效,34.,35.层析介质,36.常用生化试剂,37.其他生化试剂,38.耗材,39.标准品,40.新增产品

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